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NCI-H460
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NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460

NCI-H460

Cell line · 제품 번호 305020

NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...

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사용자 지정 / 추천 사항

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롯
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1

01일반 정보

설명
H460으로도 알려진 NCI-H460은 대세포 폐암을 앓고 있는 남성 환자에게서 추출한 것입니다. NCI-H460 세포는 10% FBS가 보충된 RPMI 1640에서 33시간 동안 2배로 성장한 A549 세포보다 2배 더 빠르게 성장하는 부착성 세포입니다. 누드 마우스를 포함한 시험관 및 생체 내 모델 모두에서 종양을 형성할 수 있습니다. NCI-H460 세포는 정상 폐 조직에 필적하는 높은 수준의 p53 mRNA를 발현하는 동시에 총체적인 구조적 DNA 이상은 보이지 않는 것으로 나타났습니다. 케라틴과 비멘틴에는 양성으로 염색되지만 신경섬유 삼중 단백질에는 음성으로 염색됩니다. 이소효소 분석 결과 HPRT는 이러한 비소세포 폐암 세포주의 표면에 국한되어 있는 것으로 나타났습니다. AK-1, ES-D 및 Me-2 동종 효소는 레벨 1에서 발현되는 반면, G6PD 및 PGM1 및 PGM3 동종 효소는 각각 레벨 B 및 1-2에서 발현됩니다. 세포는 모달 염색체 수가 57번인 저삼배체 핵형을 가지며, 53~65번 범위입니다. Der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22) 등 7개 마커 염색체가 모든 세포에 공통으로 존재합니다. p53 mRNA의 발현 수준이 높아 비소세포폐암의 분자 기전 연구에 적합한 모델이라고 할 수 있죠.
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  • NCI-H460
  • NCI.H460
  • H-460
  • NCIH460
  • NCI-HUT-460
  • NCI-460

02분류

생물체
인간
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피
종양 유발성
예

04식별자

인용
H-460(사이티온 카탈로그 번호 305020)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0459

05취급 및 배양

배지
RPMI 1640, w: 2.0mM 안정 글루타민, w: 2.0g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820700a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

07기부자

민족
유럽