.jpg)
- Doku
- Akciğer
- Hastalık
- Akciğer büyük hücreli karsinomu
- Metastaz yeri
- Plevral efüzyon
- Eş anlamlılar
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Belgeler
NCI-H460
Cell line · Ürün numarası 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Kişiselleştirme / Öneriler
- NCI-H460Cell line€430.00
Önerilen (en taze parti)
01Genel bilgiler
- Açıklama
- H460 olarak da bilinen NCI-H460, büyük hücreli akciğer karsinomu olan bir erkek hastadan türetilmiştir. NCI-H460 hücreleri, %10 FBS ile desteklenmiş RPMI 1640'ta 33 saatlik ikiye katlama süresiyle A549 hücrelerinden iki kat daha hızlı büyüyen yapışık hücrelerdir. Çıplak fareler de dahil olmak üzere hem in vitro hem de in vivo modellerde tümör oluşturabilirler. NCI-H460 hücrelerinin normal akciğer dokusuyla karşılaştırılabilir yüksek seviyelerde p53 mRNA eksprese ettiği ve kaba yapısal DNA anormallikleri sergilemediği gösterilmiştir. Keratin ve vimentin için pozitif boyanırlar ancak nörofilament üçlü protein için negatiftirler. İzoenzim analizi, HPRT'nin bu küçük hücreli olmayan akciğer kanseri hücre hatlarının yüzeyinde lokalize olduğunu göstermiştir. AK-1, ES-D ve Me-2 izoenzimleri seviye 1'de ifade edilirken, G6PD ve PGM1 ve PGM3 izoenzimleri sırasıyla seviye B ve 1-2'de ifade edilmektedir. Hücreler, 53 ila 65 arasında değişen 57 modal kromozom sayısına sahip hipotriploid bir karyotipe sahiptir. Der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22) dahil olmak üzere yedi işaret kromozomu tüm hücrelerde ortaktır. p53 mRNA'sının yüksek ekspresyon seviyeleri, onları küçük hücreli olmayan akciğer kanserinin moleküler mekanizmalarını incelemek için uygun bir model haline getirir.
- Doku
- Akciğer
- Hastalık
- Akciğer büyük hücreli karsinomu
- Metastaz yeri
- Plevral efüzyon
- Eş anlamlılar
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Sınıflandırma
- Canlı
- İnsan
- Cinsiyet
- Erkek
- Büyüme özellikleri
- Bağlı
- Biyogüvenlik seviyesi
- 1
03Özellikler
- Morfoloji
- Epitelyal
- Tümör oluşturucu
- Evet
04Tanımlayıcılar
- Kaynak gösterimi
- H-460 (Cytion katalog numarası 305020)
- NCBI Vergi Kimlik Numarası
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05İşleme ve yetiştirme
- Besiyeri
- RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
- Kuluçka ortamı
37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.
- Takviyeler
- Ortamı %10 FBS ile takviye edin
- Ayrıştırma reaktifi
- Accutase
- Alt kültür oluşturma
- Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
- Sıvı değişimi
- haftada 2 ila 3 kez
- Çözme ve kültürleme
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon
- Kısırlık
Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.
Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.
- Dondurma ortamı
- Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
- Saklama koşulları
Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.
- Nakliye koşulları
Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.
07Bağışçı
- Etnik köken
- Avrupa
08Yasal ve güvenlik
- Güvenlik önlemleri
- İleride çözdürmek üzere sıvı nitrojen içinde bir kriyoviyal saklamayı planlarken, sıkı güvenlik önlemlerine uymak zorunludur. Uygun koruyucu eldivenler ve giysiler şarttır ve dondurulmuş numunelerin sıvı nitrojen tankına veya tanktan transferi sırasında yüz maskesi veya koruyucu gözlük kullanılması gerekir. Bu, çıkarma sırasında keskin parçaların fırlamasına neden olabilecek potansiyel kriyoviyal patlamalardan kaynaklanan yaralanma riskini azaltmak içindir.
- Garanti
Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz
Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın
- Malzeme Transfer Anlaşması gereklidir
- Evet
.jpg)
.jpg)
