İçeriğe atla
NCI-H1975
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer adenokarsinomu
Eş anlamlılar
NCI-H1975, H-1975, NCIH1975

NCI-H1975

Cell line · Ürün numarası 305067

The NCI-H1975 cell line is a well-established model derived from human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma. This cell line ...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H1975 hücre hattı, insan küçük hücreli dışı akciğer karsinomundan (NSCLC), özellikle adenokarsinomdan türetilen iyi kurulmuş bir modeldir. Bu hücre hattı, epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) genindeki ikili mutasyonları nedeniyle özellikle önemlidir. Ekzon 21'de L858R aktive edici mutasyonu ve ekzon 20'de gefitinib ve erlotinib gibi birinci nesil tirozin kinaz inhibitörlerine (TKI'ler) direnç kazandıran T790M mutasyonunu barındırır. Bu genetik özellikler NCI-H1975'i ilaç direnci mekanizmalarını incelemek ve yeni nesil EGFR inhibitörlerini test etmek için değerli bir araç haline getirmektedir.

T790M mutasyonu EGFR'nin ATP-bağlama cebini değiştirerek, reseptör sinyal aktivitesini korurken önceki EGFR inhibitörlerinin etkinliğini azaltır. Bu özellik, T790M mutant EGFR'yi seçici olarak hedeflerken vahşi tip EGFR'yi koruyarak hedef dışı etkileri azaltan osimertinib gibi üçüncü nesil inhibitörlere yönelik araştırmaları yönlendirmiştir. NCI-H1975 kullanılarak yapılan çalışmalar, tümör hücresi proliferasyonu ve sağkalımında çok önemli olan PI3K/AKT ve RAS/RAF/MEK/ERK yolakları üzerindeki aşağı akış etkileri de dahil olmak üzere, bu mutasyonların EGFR aracılı sinyal yolakları üzerindeki yapısal ve işlevsel etkilerinin anlaşılmasına katkıda bulunmuştur.

İlaç direnci araştırmalarındaki rolüne ek olarak NCI-H1975, birden fazla yolu hedefleyerek direncin üstesinden gelmeyi amaçlayan kombinasyon tedavilerinin klinik öncesi değerlendirmelerinde kullanılmaktadır. Kopya sayısı varyasyonları ve mutasyonel manzaralar hakkında ayrıntılı veriler de dahil olmak üzere iyi karakterize edilmiş genetik ve moleküler profili, NSCLC biyolojisi ve terapötik gelişim çalışmalarında temel bir model olarak statüsünü sağlamlaştırmıştır.

Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer adenokarsinomu
Eş anlamlılar
  • NCI-H1975
  • H-1975
  • NCIH1975

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H1975 (Cytion katalog numarası 305067)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1511

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Etnik köken
Avrupa