NCI-H1975

NCI-H1975 细胞系是一种从人类非小细胞肺癌（NSCLC），特别是腺癌中提取的成熟模型。该细胞系因其表皮生长因子受体（EGFR）基因的双重突变而显得尤为重要。它在第 21 号外显子中携带 L858R 激活突变，在第 20 号外显子中携带 T790M 突变，从而对吉非替尼和厄洛替尼等第一代酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）产生耐药性。这些遗传特征使NCI-H1975成为研究耐药机制和测试下一代表皮生长因子受体抑制剂的重要工具。

T790M 突变改变了表皮生长因子受体的 ATP 结合袋，降低了早期表皮生长因子受体抑制剂的疗效，同时保持了受体的信号活性。这一特性推动了对奥希替尼等第三代抑制剂的研究，奥希替尼可选择性地靶向 T790M 突变的表皮生长因子受体，同时保留野生型表皮生长因子受体，减少脱靶效应。利用NCI-H1975进行的研究有助于了解这些突变对表皮生长因子受体介导的信号通路的结构和功能影响，包括对PI3K/AKT和RAS/RAF/MEK/ERK通路的下游影响，这些通路在肿瘤细胞增殖和存活中起着关键作用。

除了在耐药性研究中发挥作用外，NCI-H1975 还被用于旨在通过靶向多种途径克服耐药性的联合疗法的临床前评估。NCI-H1975的遗传和分子特征描述良好，包括拷贝数变异和突变图谱的详细数据，这巩固了它作为研究NSCLC生物学和治疗开发的重要模型的地位。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。