NCI-H1975

Celična linija NCI-H1975 je uveljavljen model, ki izhaja iz človeškega nedrobnoceličnega pljučnega karcinoma (NSCLC), zlasti adenokarcinoma. Ta celična linija je še posebej pomembna zaradi dvojnih mutacij v genu za receptor epidermalnega rastnega faktorja (EGFR). Vsebuje aktivacijsko mutacijo L858R v eksonu 21 in mutacijo T790M v eksonu 20, ki dajeta odpornost na zaviralce tirozinske kinaze (TKI) prve generacije, kot sta gefitinib in erlotinib. Zaradi teh genetskih značilnosti je NCI-H1975 dragoceno orodje za preučevanje mehanizmov odpornosti na zdravila in testiranje inhibitorjev EGFR naslednje generacije.

Mutacija T790M spreminja žep za vezavo ATP v EGFR, kar zmanjšuje učinkovitost prejšnjih zaviralcev EGFR, hkrati pa ohranja signalno aktivnost receptorja. Ta lastnost je spodbudila raziskave inhibitorjev tretje generacije, kot je osimertinib, ki selektivno delujejo na mutacijo T790M EGFR, hkrati pa varčujejo EGFR divjega tipa, kar zmanjšuje učinke izven cilja. Študije z NCI-H1975 so prispevale k razumevanju strukturnih in funkcionalnih vplivov teh mutacij na signalne poti, ki jih posreduje EGFR, vključno z nadaljnjimi učinki na poti PI3K/AKT in RAS/RAF/MEK/ERK, ki so ključne za proliferacijo in preživetje tumorskih celic.

Poleg vloge pri raziskavah odpornosti na zdravila se NCI-H1975 uporablja pri predkliničnih ocenah kombiniranih terapij, katerih cilj je premagati odpornost z delovanjem na več poti. Njegov dobro opisan genetski in molekularni profil, vključno s podrobnimi podatki o spremembah števila kopij in mutacijskih pokrajinah, je utrdil njegov status bistvenega modela pri preučevanju biologije NSCLC in razvoju terapij.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo