NCI-H1975

Linia komórkowa NCI-H1975 jest dobrze ugruntowanym modelem pochodzącym z ludzkiego niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC), w szczególności gruczolakoraka. Ta linia komórkowa jest szczególnie istotna ze względu na podwójne mutacje w genie receptora naskórkowego czynnika wzrostu (EGFR). Zawiera mutację aktywującą L858R w eksonie 21 i mutację T790M w eksonie 20, które nadają oporność na inhibitory kinazy tyrozynowej (TKI) pierwszej generacji, takie jak gefitynib i erlotynib. Te cechy genetyczne sprawiają, że NCI-H1975 jest cennym narzędziem do badania mechanizmów oporności na leki i testowania inhibitorów EGFR nowej generacji.

Mutacja T790M zmienia kieszeń wiążącą ATP w EGFR, zmniejszając skuteczność wcześniejszych inhibitorów EGFR przy jednoczesnym utrzymaniu aktywności sygnalizacyjnej receptora. Ta właściwość doprowadziła do badań nad inhibitorami trzeciej generacji, takimi jak osimertinib, które selektywnie celują w zmutowany EGFR T790M, oszczędzając jednocześnie EGFR typu dzikiego, zmniejszając efekty poza celem. Badania z wykorzystaniem NCI-H1975 przyczyniły się do zrozumienia strukturalnego i funkcjonalnego wpływu tych mutacji na szlaki sygnałowe, w których pośredniczy EGFR, w tym na szlaki PI3K/AKT i RAS/RAF/MEK/ERK, które mają kluczowe znaczenie dla proliferacji i przeżycia komórek nowotworowych.

Oprócz swojej roli w badaniach nad opornością na leki, NCI-H1975 jest stosowany w przedklinicznych ocenach terapii skojarzonych, które mają na celu przezwyciężenie oporności poprzez ukierunkowanie na wiele szlaków. Jego dobrze scharakteryzowany profil genetyczny i molekularny, w tym szczegółowe dane na temat zmian liczby kopii i krajobrazów mutacji, ugruntował jego status jako istotnego modelu w badaniu biologii NSCLC i rozwoju terapii.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym