NCI-H1975

La lignée cellulaire NCI-H1975 est un modèle bien établi dérivé du carcinome pulmonaire non à petites cellules (CPNPC) humain, plus précisément de l'adénocarcinome. Cette lignée cellulaire est particulièrement importante en raison de ses doubles mutations dans le gène du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR). Elle héberge la mutation activatrice L858R dans l'exon 21 et la mutation T790M dans l'exon 20, qui confère une résistance aux inhibiteurs de tyrosine kinase (ITK) de première génération tels que le géfitinib et l'erlotinib. Ces caractéristiques génétiques font de NCI-H1975 un outil précieux pour étudier les mécanismes de résistance aux médicaments et tester les inhibiteurs de l'EGFR de nouvelle génération.

La mutation T790M modifie la poche de liaison à l'ATP de l'EGFR, réduisant l'efficacité des premiers inhibiteurs de l'EGFR tout en maintenant l'activité de signalisation du récepteur. Cette propriété a motivé la recherche d'inhibiteurs de troisième génération, tels que l'osimertinib, qui ciblent sélectivement l'EGFR mutant T790M tout en épargnant l'EGFR de type sauvage, réduisant ainsi les effets hors cible. Les études réalisées avec NCI-H1975 ont contribué à la compréhension des impacts structurels et fonctionnels de ces mutations sur les voies de signalisation médiées par l'EGFR, y compris les effets en aval sur les voies PI3K/AKT et RAS/RAF/MEK/ERK, qui jouent un rôle essentiel dans la prolifération et la survie des cellules tumorales.

Outre son rôle dans la recherche sur la résistance aux médicaments, NCI-H1975 est utilisé dans les évaluations précliniques de thérapies combinées qui visent à surmonter la résistance en ciblant plusieurs voies. Son profil génétique et moléculaire bien caractérisé, comprenant des données détaillées sur les variations du nombre de copies et les paysages mutationnels, a consolidé son statut de modèle essentiel dans l'étude de la biologie du CBNPC et du développement thérapeutique.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie