NCI-H1975

Garis sel NCI-H1975 adalah model mapan yang berasal dari karsinoma paru sel non-kecil manusia (NSCLC), khususnya adenokarsinoma. Garis sel ini sangat signifikan karena mutasi ganda pada gen reseptor faktor pertumbuhan epidermal (EGFR). Ini menyimpan mutasi pengaktifan L858R pada ekson 21 dan mutasi T790M pada ekson 20, yang memberikan resistensi terhadap penghambat tirosin kinase generasi pertama (TKI) seperti gefitinib dan erlotinib. Karakteristik genetik ini menjadikan NCI-H1975 sebagai alat yang berharga untuk mempelajari mekanisme resistensi obat dan menguji inhibitor EGFR generasi berikutnya.

Mutasi T790M mengubah kantong pengikat ATP dari EGFR, mengurangi kemanjuran inhibitor EGFR sebelumnya sambil mempertahankan aktivitas pensinyalan reseptor. Sifat ini telah mendorong penelitian terhadap inhibitor generasi ketiga, seperti osimertinib, yang secara selektif menargetkan EGFR mutan T790M sambil menyisakan EGFR tipe liar, sehingga mengurangi efek yang tidak tepat sasaran. Studi yang menggunakan NCI-H1975 telah berkontribusi dalam memahami dampak struktural dan fungsional dari mutasi ini pada jalur pensinyalan yang dimediasi oleh EGFR, termasuk efek hilir pada jalur PI3K/AKT dan RAS/RAF/MEK/ERK, yang sangat penting dalam proliferasi dan kelangsungan hidup sel tumor.

Selain perannya dalam penelitian resistensi obat, NCI-H1975 digunakan dalam evaluasi praklinis terapi kombinasi yang bertujuan untuk mengatasi resistensi dengan menargetkan berbagai jalur. Profil genetik dan molekulernya yang terkarakterisasi dengan baik, termasuk data terperinci tentang variasi jumlah salinan dan lanskap mutasi, telah memantapkan statusnya sebagai model penting dalam studi biologi NSCLC dan pengembangan terapi.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami