NCI-H1975

NCI-H1975-cellelinjen er en veletableret model, der stammer fra humant ikke-småcellet lungekarcinom (NSCLC), specifikt adenokarcinom. Denne cellelinje er særlig vigtig på grund af dens dobbelte mutationer i genet for den epidermale vækstfaktorreceptor (EGFR). Den har den aktiverende mutation L858R i exon 21 og mutationen T790M i exon 20, som giver resistens over for førstegenerations tyrosinkinasehæmmere (TKI'er) som gefitinib og erlotinib. Disse genetiske egenskaber gør NCI-H1975 til et værdifuldt værktøj til at studere resistensmekanismer og teste næste generation af EGFR-hæmmere.

T790M-mutationen ændrer den ATP-bindende lomme i EGFR, hvilket reducerer effekten af tidligere EGFR-hæmmere, samtidig med at receptorens signalaktivitet opretholdes. Denne egenskab har drevet forskning i tredjegenerationshæmmere, såsom osimertinib, som selektivt retter sig mod T790M-mutant EGFR, mens de skåner vildtype EGFR, hvilket reducerer off-target-effekter. Undersøgelser med NCI-H1975 har bidraget til at forstå de strukturelle og funktionelle virkninger af disse mutationer på EGFR-medierede signalveje, herunder downstream-effekter på PI3K/AKT- og RAS/RAF/MEK/ERK-veje, som er centrale for tumorcellers spredning og overlevelse.

Ud over sin rolle i forskning i lægemiddelresistens anvendes NCI-H1975 i prækliniske evalueringer af kombinationsbehandlinger, der sigter mod at overvinde resistens ved at målrette mod flere veje. Dens velkarakteriserede genetiske og molekylære profil, herunder detaljerede data om kopinummervariationer og mutationslandskaber, har styrket dens status som en vigtig model i studiet af NSCLC-biologi og terapeutisk udvikling.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring