NCI-H1975

NCI-H1975-cellelinjen er en veletablert modell avledet fra humant ikke-småcellet lungekarsinom (NSCLC), nærmere bestemt adenokarsinom. Denne cellelinjen er spesielt viktig på grunn av sine doble mutasjoner i EGFR-genet (epidermal vekstfaktorreseptor). Den har den aktiverende mutasjonen L858R i ekson 21 og mutasjonen T790M i ekson 20, som gir resistens mot førstegenerasjons tyrosinkinasehemmere (TKI-er) som gefitinib og erlotinib. Disse genetiske egenskapene gjør NCI-H1975 til et verdifullt verktøy for å studere resistensmekanismer og teste neste generasjons EGFR-hemmere.

T790M-mutasjonen endrer den ATP-bindende lommen i EGFR, noe som reduserer effekten av tidligere EGFR-hemmere, samtidig som reseptorens signalaktivitet opprettholdes. Denne egenskapen har drevet frem forskning på tredjegenerasjonshemmere, som osimertinib, som selektivt retter seg mot T790M-mutant EGFR, samtidig som villtype EGFR skånes, noe som reduserer off-target-effekter. Studier med NCI-H1975 har bidratt til å forstå de strukturelle og funksjonelle virkningene av disse mutasjonene på EGFR-medierte signalveier, inkludert nedstrøms effekter på PI3K/AKT- og RAS/RAF/MEK/ERK-veiene, som er sentrale for spredning og overlevelse av tumorceller.

I tillegg til sin rolle i forskning på legemiddelresistens, brukes NCI-H1975 i prekliniske evalueringer av kombinasjonsbehandlinger som tar sikte på å overvinne resistens ved å rette seg mot flere veier. Den velkarakteriserte genetiske og molekylære profilen, inkludert detaljerte data om kopitallvariasjoner og mutasjonslandskap, har befestet dens status som en viktig modell i studier av NSCLC-biologi og terapiutvikling.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring