NCI-H1975

La línea celular NCI-H1975 es un modelo bien establecido derivado del carcinoma pulmonar humano de células no pequeñas (CPNM), concretamente del adenocarcinoma. Esta línea celular es especialmente significativa debido a su doble mutación en el gen del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Alberga la mutación activadora L858R en el exón 21 y la mutación T790M en el exón 20, que confiere resistencia a los inhibidores de la tirosina cinasa (TKI) de primera generación, como el gefitinib y el erlotinib. Estas características genéticas hacen del NCI-H1975 una herramienta valiosa para estudiar los mecanismos de resistencia a fármacos y probar inhibidores del EGFR de nueva generación.

La mutación T790M altera el bolsillo de unión al ATP del EGFR, lo que reduce la eficacia de los primeros inhibidores del EGFR al tiempo que mantiene la actividad de señalización del receptor. Esta propiedad ha impulsado la investigación de inhibidores de tercera generación, como el osimertinib, que actúan selectivamente sobre el EGFR mutante T790M sin afectar al EGFR silvestre, reduciendo así los efectos no deseados. Los estudios realizados con el NCI-H1975 han contribuido a comprender los efectos estructurales y funcionales de estas mutaciones en las vías de señalización mediadas por el EGFR, incluidos los efectos descendentes en las vías PI3K/AKT y RAS/RAF/MEK/ERK, que son fundamentales para la proliferación y supervivencia de las células tumorales.

Además de su papel en la investigación de la resistencia a fármacos, el NCI-H1975 se emplea en evaluaciones preclínicas de terapias combinadas que pretenden superar la resistencia actuando sobre múltiples vías. Su perfil genético y molecular bien caracterizado, que incluye datos detallados sobre variaciones en el número de copias y paisajes mutacionales, ha consolidado su estatus como modelo esencial en el estudio de la biología del CPNM y el desarrollo terapéutico.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía