NCI-H1975

Az NCI-H1975 sejtvonal egy jól bevált modell, amely humán nem kissejtes tüdőrákból (NSCLC), különösen adenokarcinómából származik. Ez a sejtvonal különösen jelentős az epidermális növekedési faktor receptor (EGFR) gén kettős mutációja miatt. A 21-es exonban L858R aktiváló mutációt és a 20-as exonban T790M mutációt tartalmaz, amely rezisztenciát biztosít az első generációs tirozinkináz-inhibitorokkal (TKI-k), például a gefitinib és az erlotinib ellen. Ezek a genetikai jellemzők teszik az NCI-H1975-öt értékes eszközzé a gyógyszerrezisztencia mechanizmusainak tanulmányozásához és az új generációs EGFR-inhibitorok teszteléséhez.

A T790M mutáció megváltoztatja az EGFR ATP-kötő zsebét, csökkentve a korábbi EGFR-gátlók hatékonyságát, miközben fenntartja a receptor jelátviteli aktivitását. Ez a tulajdonság ösztönözte a harmadik generációs inhibitorok, például az osimertinib kutatását, amelyek szelektíven a T790M mutáns EGFR-t célozzák, miközben kímélik a vad típusú EGFR-t, csökkentve a célponton kívüli hatásokat. Az NCI-H1975-tel végzett vizsgálatok hozzájárultak e mutációknak az EGFR által közvetített jelátviteli útvonalakra gyakorolt szerkezeti és funkcionális hatásainak megértéséhez, beleértve a PI3K/AKT és a RAS/RAF/MEK/ERK útvonalakra gyakorolt downstream hatásokat, amelyek kulcsfontosságúak a tumorsejtek proliferációjában és túlélésében.

A gyógyszerrezisztencia kutatásában betöltött szerepe mellett az NCI-H1975-öt olyan kombinált terápiák preklinikai értékelésében is alkalmazzák, amelyek célja a rezisztencia leküzdése több útvonal megcélzásával. Jól jellemzett genetikai és molekuláris profilja, beleértve a kópiaszám-változásokra és a mutációs tájképekre vonatkozó részletes adatokat, megszilárdította státuszát, mint az NSCLC biológiájának és a terápiás fejlesztésnek a tanulmányozásában nélkülözhetetlen modell.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban