Tartalomra ugrás
NCI-H196
Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Szinonimák
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumentumok

NCI-H196

Cell line · Termékszám 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az NCI-H196 egy kissejtes tüdőrák (SCLC) sejtvonal, amelyet a rák progressziójának, a kemoterápiás rezisztenciának és az oxidatív stresszre adott sejtválaszoknak a tanulmányozására használnak. Az NCI-H196-tal végzett kutatások kimutatták, hogy a sejt érzékeny a pirrolidin-ditiokarbamát (PDTC), egy prooxidáns szer citotoxikus hatásaira. A PDTC az S-fázisú sejtciklus leállását idézi elő, és dózisfüggő módon jelentősen csökkenti az NCI-H196 sejtek életképességét. Ez a citotoxicitás az oxidatív stressz indukciójának tulajdonítható, amit a megnövekedett reaktív oxigénfajok (ROS) és az oxidatív stresszel kapcsolatos gének expressziójának változása bizonyít. Az antioxidánsok, mint az N-acetil-L-cisztein (NAC) hozzáadása hatékonyan visszafordíthatja a PDTC által kiváltott citotoxicitást, ami megerősíti az oxidatív stressz szerepét a sejthalálban.

További vizsgálatok kimutatták, hogy a PDTC fokozza a ciszplatin, az SCLC kezelésében alkalmazott első vonalbeli kemoterápiás gyógyszer citotoxicitását. A ciszplatin alacsony dózisainak kombinálása a PDTC nem toxikus koncentrációjával szinergista citotoxicitást eredményez az NCI-H196 sejtekben. Ez a kombinált terápia feltehetően azért hatékony, mert a PDTC lefelé szabályozza az ATP7A-t, egy réz efflux transzportert, amely a ciszplatinrezisztenciával hozható összefüggésbe. Az ATP7A gátlásával a PDTC növelheti az intracelluláris rezet és érzékenyítheti az NCI-H196 sejteket a ciszplatinnal szemben, ami kiemeli az SCLC kiegészítő terápiájában rejlő lehetőségeket.

Szövet
Tüdő
Betegség
Tüdő kissejtes karcinóma
Áttétes hely
Mellhártya folyadékgyülem
Alkalmazások
3D sejtkultúra, rákkutatás
Szinonimák
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Azonosítók

Hivatkozás
NCI-H196 (Cytion katalógusszám: 300390)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

06Adományozó

Az adományozó életkora
68 év
Etnikai hovatartozás
Európai