Pāriet uz saturu
NCI-H196
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu sīkšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumenti

NCI-H196

Cell line · Preces numurs 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H196 ir mazo šūnu plaušu vēža (SCLC) šūnu līnija, ko izmanto, lai pētītu vēža progresēšanas mehānismus, rezistenci pret ķīmijterapiju un šūnu reakciju uz oksidatīvo stresu. Pētījumi ar NCI-H196 ir pierādījuši tās jutību pret prooksidantu prooksidanta pirolidīna ditiokarbamāta (PDTC) citotoksisko iedarbību. PDTC izraisa S-fāzes šūnu cikla apstāšanos un ievērojami samazina NCI-H196 šūnu dzīvotspēju atkarībā no devas. Šī citotoksicitāte ir saistīta ar oksidatīvā stresa indukciju, par ko liecina paaugstināta reaktīvo skābekļa savienojumu (ROS) un ar oksidatīvo stresu saistīto gēnu ekspresijas izmaiņas. Antioksidantu, piemēram, N-acetil-L-cisteīna (NAC), pievienošana var efektīvi mainīt PDTC izraisīto citotoksicitāti, apstiprinot oksidatīvā stresa nozīmi šūnu bojāejas procesā.

Turpmāki pētījumi liecina, ka PDTC pastiprina cisplatīna - pirmās līnijas ķīmijterapijas līdzekļa, ko izmanto SCLC ārstēšanā, - citotoksicitāti. Kombinējot nelielas cisplatīna devas ar netoksisku PDTC koncentrāciju, tiek panākta sinerģiska citotoksicitāte NCI-H196 šūnās. Tiek uzskatīts, ka šī kombinētā terapija ir efektīva, jo PDTC pazemina ATP7A, vara izplūdes transportiera, kas saistīts ar rezistenci pret cisplatīnu, regulāciju. Inhibējot ATP7A, PDTC var palielināt intracelulārā vara daudzumu un jutināt NCI-H196 šūnas pret cisplatīnu, tādējādi uzsverot PDTC kā papildu terapijas potenciālu SCLC ārstēšanā.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu sīkšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, Vēža pētniecība
Sinonīmi
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
NCI-H196 (Cytion kataloga numurs 300390)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

06Ziedotājs

Donora vecums
68 gadi
Etniskā piederība
Eiropas