Skip to content
NCI-H196
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
NCI-H196, H-196, NCIH196

Documents

NCI-H196

Cell line · Product number 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H196 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก (SCLC) ที่ใช้ศึกษาเกี่ยวกับกลไกการลุกลามของมะเร็ง ความต้านทานต่อเคมีบำบัด และการตอบสนองของเซลล์ต่อความเครียดออกซิเดชันงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับ NCI-H196 ได้แสดงให้เห็นถึงความไวต่อผล cytotoxic ของ pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC) ซึ่งเป็นสารที่มีฤทธิ์เป็น pro-oxidant PDTC กระตุ้นการหยุดของเซลล์ในระยะ S ของวงจรชีวิตเซลล์ และลดความสามารถในการอยู่รอดของเซลล์ NCI-H196 อย่างมีนัยสำคัญในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับขนาดของสารความเป็นพิษต่อเซลล์นี้เกิดจากการเหนี่ยวนำให้เกิดภาวะเครียดออกซิเดชัน ซึ่งเห็นได้จากการเพิ่มขึ้นของอนุมูลอิสระออกซิเจน (ROS) และการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภาวะเครียดออกซิเดชัน การเติมสารต้านอนุมูลอิสระ เช่น N-acetyl-L-cysteine (NAC) สามารถย้อนกลับความเป็นพิษต่อเซลล์ที่เกิดจาก PDTC ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งยืนยันบทบาทของภาวะเครียดออกซิเดชันในการตายของเซลล์

การศึกษาเพิ่มเติมได้แสดงให้เห็นว่า PDTC ช่วยเพิ่มความเป็นพิษต่อเซลล์ของซิสพลาติน ซึ่งเป็นยาเคมีบำบัดแนวหน้าในการรักษา SCLC การผสมผสานระหว่างซิสพลาตินในปริมาณต่ำกับ PDTC ในความเข้มข้นที่ไม่เป็นพิษ ส่งผลให้เกิดความเป็นพิษต่อเซลล์แบบเสริมฤทธิ์กันในเซลล์ NCI-H196 การบำบัดแบบผสมผสานนี้เชื่อว่ามีประสิทธิภาพเนื่องจาก PDTC ช่วยลดการแสดงออกของ ATP7A ซึ่งเป็นโปรตีนขนส่งทองแดงที่เกี่ยวข้องกับความต้านทานต่อซิสพลาตินโดยการยับยั้ง ATP7A, PDTC อาจเพิ่มปริมาณทองแดงภายในเซลล์และทำให้เซลล์ NCI-H196 ไวต่อซิสพลาตินมากขึ้น ซึ่งเน้นให้เห็นถึงศักยภาพในการใช้เป็นยาร่วมในการรักษา SCLC

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, การวิจัยมะเร็ง
Synonyms
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Identifiers

Citation
NCI-H196 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300390)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

06Donor

Donor age
68 ปี
Ethnicity
ยุโรป