NCI-H196

NCI-H196 es una línea celular de cáncer de pulmón de células pequeñas (SCLC) que se utiliza para estudiar los mecanismos de progresión del cáncer, la resistencia a la quimioterapia y las respuestas celulares al estrés oxidativo. Las investigaciones con la línea NCI-H196 han demostrado su sensibilidad a los efectos citotóxicos del ditiocarbamato de pirrolidina (PDTC), un agente prooxidante. El PDTC induce una detención del ciclo celular en la fase S y reduce significativamente la viabilidad de las células NCI-H196 de manera dependiente de la dosis. Esta citotoxicidad se atribuye a la inducción de estrés oxidativo, como lo demuestran el aumento de las especies reactivas de oxígeno (ROS) y los cambios en la expresión de genes relacionados con el estrés oxidativo. La adición de antioxidantes como la N-acetil-L-cisteína (NAC) puede revertir eficazmente la citotoxicidad inducida por el PDTC, lo que confirma el papel del estrés oxidativo en la muerte celular.

Otros estudios han demostrado que el PDTC potencia la citotoxicidad del cisplatino, un fármaco de quimioterapia de primera línea utilizado para el tratamiento del SCLC. La combinación de dosis bajas de cisplatino con concentraciones no tóxicas de PDTC da lugar a una citotoxicidad sinérgica en las células NCI-H196. Se cree que esta terapia combinada es eficaz debido a que el PDTC regula a la baja la expresión de ATP7A, un transportador de eflujo de cobre asociado a la resistencia al cisplatino. Al inhibir la ATP7A, el PDTC puede aumentar los niveles intracelulares de cobre y sensibilizar a las células NCI-H196 al cisplatino, lo que destaca su potencial como terapia complementaria para el SCLC.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.