NCI-H3122

La línea celular NCI-H3122 se deriva de un cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) y se caracteriza por la presencia del gen de fusión EML4-ALK, que resulta de una translocación cromosómica entre la proteína similar a la proteína asociada a los microtúbulos de los equinodermos 4 (EML4) y la quinasa del linfoma anaplásico (ALK). Esta fusión impulsa la señalización oncogénica y hace que las células NCI-H3122 dependan en gran medida de la señalización de ALK para su supervivencia, lo que se conoce como «adicción a ALK». La línea celular NCI-H3122 se ha convertido en un modelo clave para el estudio de terapias dirigidas, particularmente para inhibidores de ALK como el crizotinib.

Los estudios han demostrado que las células NCI-H3122 son sensibles al crizotinib, el cual inhibe la fosforilación de ALK y sus dianas posteriores, como las vías AKT y ERK. Sin embargo, a menudo se desarrolla resistencia al crizotinib, por lo general debido a vías de señalización alternativas, como la activación del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR). Este mecanismo de resistencia se ha confirmado en variantes resistentes de NCI-H3122, en las que se observó una mayor fosforilación de EGFR, y se demostró que la inhibición dual de ALK y EGFR mediante el uso de crizotinib e inhibidores de EGFR, como afatinib o erlotinib, permite superar la resistencia.

La línea celular NCI-H3122 se utiliza con frecuencia para explorar terapias combinadas destinadas a prevenir o revertir la resistencia a los medicamentos. Por ejemplo, actuar sobre las vías de ALK y EGFR ha sido una estrategia exitosa en modelos preclínicos, y esta inhibición dual se ha sugerido como un posible enfoque terapéutico para pacientes con CPCNP positivo para ALK y resistente al crizotinib.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.