NCI-H3122

NCI-H3122 rakuliin on saadud mitteväikerakk-kopsuvähist (NSCLC) ja seda iseloomustab EML4-ALK fusioongeeni olemasolu, mis tuleneb kromosomaalsest translokatsioonist ekinodermi mikrotubuliga assotsieerunud valgu sarnase 4 (EML4) ja anaplastilise lümfoomi kinaasi (ALK) vahel. See fusioon juhib onkogeenset signalisatsiooni ja muudab NCI-H3122 rakud ellujäämiseks väga sõltuvaks ALK-signalisatsioonist, mida nimetatakse "ALK-sõltuvuseks" NCI-H3122 on muutunud oluliseks mudeliks sihtotstarbeliste ravimeetodite, eriti ALK inhibiitorite, nagu kritsotiniib, uurimiseks.

Uuringud on näidanud, et NCI-H3122 rakud on tundlikud kritsotiniibi suhtes, mis pärsib ALK fosforüülimist ja selle allavoolu sihtmärke, nagu AKT- ja ERK-radu. Siiski tekib sageli resistentsus kritsotiniibi suhtes, mis on tavaliselt tingitud alternatiivsetest signaaliradadest, näiteks epidermise kasvufaktori retseptori (EGFR) aktiveerimisest. See resistentsusmehhanism on leidnud kinnitust NCI-H3122 resistentsete variantide puhul, kus täheldati EGFR-i suurenenud fosforüleerimist ning näidati, et ALK ja EGFR-i kahekordne inhibeerimine kritsotiniibi ja EGFR-i inhibiitorite, nagu afatiniib või erlotiniib, abil võimaldab resistentsust ületada.

NCI-H3122 kasutatakse sageli kombineeritud ravi uurimiseks, mille eesmärk on ravimi resistentsuse vältimine või ümberpööramine. Näiteks on nii ALK- kui ka EGFR-radadele suunatud ravi olnud edukas strateegia prekliinilistes mudelites ning seda kahekordset inhibeerimist on pakutud potentsiaalse ravimeetodina ALK-positiivsete, kritsotinibi suhtes resistentsete NSCLC patsientide puhul.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest