İçeriğe atla
NCI-H196
Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
NCI-H196, H-196, NCIH196

NCI-H196

Cell line · Ürün numarası 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H196, kanser ilerleme mekanizmalarını, kemoterapi direncini ve oksidatif strese karşı hücresel tepkileri incelemek için kullanılan küçük hücreli bir akciğer kanseri (SCLC) hücre hattıdır. NCI-H196'yı içeren araştırmalar, pro-oksidan bir ajan olan pirolidin ditiyokarbamatın (PDTC) sitotoksik etkilerine karşı hassasiyetini göstermiştir. PDTC, S-fazı hücre döngüsünün durmasına neden olur ve NCI-H196 hücrelerinin canlılığını doza bağlı bir şekilde önemli ölçüde azaltır. Bu sitotoksisite, artan reaktif oksijen türleri (ROS) ve oksidatif stresle ilişkili genlerin ekspresyonundaki değişikliklerle kanıtlandığı üzere oksidatif stresin indüklenmesine bağlanmaktadır. N-asetil-L-sistein (NAC) gibi antioksidanların eklenmesi, PDTC kaynaklı sitotoksisiteyi etkili bir şekilde tersine çevirerek oksidatif stresin hücre ölümündeki rolünü doğrulayabilir.

Daha ileri çalışmalar PDTC'nin SCLC tedavisinde kullanılan birinci basamak kemoterapi ilacı olan sisplatinin sitotoksisitesini artırdığını göstermiştir. Düşük dozlarda sisplatin ile toksik olmayan PDTC konsantrasyonlarının birleştirilmesi NCI-H196 hücrelerinde sinerjik sitotoksisiteye yol açmaktadır. Bu kombinasyon tedavisinin, PDTC'nin sisplatin direnciyle ilişkili bir bakır akış taşıyıcısı olan ATP7A'yı aşağı regüle etmesi nedeniyle etkili olduğuna inanılmaktadır. PDTC, ATP7A'yı inhibe ederek hücre içi bakırı artırabilir ve NCI-H196 hücrelerini sisplatine duyarlı hale getirerek SCLC için ek bir tedavi olarak potansiyelini vurgulayabilir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Uygulamalar
3D hücre kültürü, Kanser araştırmaları
Eş anlamlılar
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H196 (Cytion katalog numarası 300390)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

06Bağışçı

Bağışçının yaşı
68 yıl
Etnik köken
Avrupa