Pereiti prie turinio
NCI-H196
Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių smulkiųjų ląstelių karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Sinonimai
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumentai

NCI-H196

Cell line · Prekės numeris 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NCI-H196 yra smulkialąstelinio plaučių vėžio (SCLC) ląstelių linija, naudojama vėžio progresavimo, atsparumo chemoterapijai ir ląstelių reakcijos į oksidacinį stresą mechanizmams tirti. Su NCI-H196 atlikti tyrimai parodė, kad ji yra jautri citotoksiniam pirolidino ditiokarbamato (PDTC), prooksidacinės medžiagos, poveikiui. PDTC sukelia S fazės ląstelių ciklo sustojimą ir žymiai sumažina NCI-H196 ląstelių gyvybingumą priklausomai nuo dozės. Šį citotoksiškumą lemia oksidacinio streso indukcija, kurią patvirtina padidėjęs reaktyviųjų deguonies formų (ROS) kiekis ir su oksidaciniu stresu susijusių genų raiškos pokyčiai. Pridėjus antioksidantų, tokių kaip N-acetil-L-cisteinas (NAC), galima veiksmingai pakeisti PDTC sukeltą citotoksiškumą, taip patvirtinant oksidacinio streso vaidmenį ląstelių žūčiai.

Tolesni tyrimai parodė, kad PDTC didina cisplatinos - pirmos eilės chemoterapijos vaisto, naudojamo SCLC gydyti - citotoksiškumą. Derinant mažas cisplatinos dozes su netoksiškomis PDTC koncentracijomis, NCI-H196 ląstelėse pasireiškia sinergetinis citotoksiškumas. Manoma, kad šis kombinuotas gydymas yra veiksmingas dėl PDTC mažinamo ATP7A - vario nutekėjimo transporterio, susijusio su atsparumu cisplatinai, - reguliavimo. Slopindamas ATP7A, PDTC gali padidinti viduląstelinio vario kiekį ir jautrinti NCI-H196 ląsteles cisplatinai, todėl PDTC gali būti naudojamas kaip papildoma SCLC terapija.

Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių smulkiųjų ląstelių karcinoma
Metastazių vieta
Pleuros išskyros
Paraiškos
3D ląstelių kultūra, Vėžio tyrimai
Sinonimai
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Identifikatoriai

Nuoroda
NCI-H196 (Cytion katalogo numeris 300390)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

06Donoras

Donoro amžius
68 metai
Etninė priklausomybė
Europos