Pereiti prie turinio
NCI-H1975
Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių adenokarcinoma
Sinonimai
NCI-H1975, H-1975, NCIH1975

Dokumentai

NCI-H1975

Cell line · Prekės numeris 305067

The NCI-H1975 cell line is a well-established model derived from human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically adenocarcinoma. This cell line ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

NCI-H1975 ląstelių linija yra gerai žinomas žmogaus nesmulkialąstelinės plaučių karcinomos (NSLPV), ypač adenokarcinomos, modelis. Ši ląstelių linija ypač svarbi dėl dvigubų epidermio augimo faktoriaus receptoriaus (EGFR) geno mutacijų. Ji turi aktyvuojančią mutaciją L858R 21 egzone ir mutaciją T790M 20 egzone, kuri suteikia atsparumą pirmos kartos tirozinkinazės inhibitoriams (TKI), tokiems kaip gefitinibas ir erlotinibas. Dėl šių genetinių savybių NCI-H1975 yra vertinga priemonė atsparumo vaistams mechanizmams tirti ir naujos kartos EGFR inhibitoriams išbandyti.

T790M mutacija pakeičia EGFR ATP surišimo kišenę, todėl sumažėja ankstesnių EGFR inhibitorių veiksmingumas, kartu išlaikant receptoriaus signalinį aktyvumą. Ši savybė paskatino trečiosios kartos inhibitorių, tokių kaip osimertinibas, kurie selektyviai veikia T790M mutavusį EGFR, tačiau tausoja laukinio tipo EGFR ir sumažina netikslinį poveikį, tyrimus. Tyrimai, atlikti naudojant NCI-H1975, padėjo suprasti šių mutacijų struktūrinį ir funkcinį poveikį EGFR tarpininkaujamiems signalų keliams, įskaitant tolesnį poveikį PI3K/AKT ir RAS/RAF/MEK/ERK keliams, kurie yra svarbiausi naviko ląstelių dauginimuisi ir išgyvenimui.

NCI-H1975 naudojamas ne tik atsparumo vaistams tyrimams, bet ir ikiklinikiniams kombinuotų gydymo metodų, kuriais siekiama įveikti atsparumą veikiant kelis kelius, vertinimams. Gerai apibūdintas jo genetinis ir molekulinis profilis, įskaitant išsamius duomenis apie kopijų skaičiaus pokyčius ir mutacijų kraštovaizdį, įtvirtino jo, kaip esminio modelio, statusą tiriant NSLPV biologiją ir kuriant gydymą.

Audinys
Plaučiai
Liga
Plaučių adenokarcinoma
Sinonimai
  • NCI-H1975
  • H-1975
  • NCIH1975

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis

04Identifikatoriai

Nuoroda
NCI-H1975 (Cytion katalogo numeris 305067)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1511

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Etninė priklausomybė
Europos