NCI-H1299

NCI-H1299, også kendt som H1299, er en human cellelinje for ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), der er etableret ud fra en lymfeknudemetastase fra en voksen mandlig patient med lungekræft. Sammen med H292-celler anvendes H1299 i vid udstrækning som en NSCLC-model inden for kræftbiologi og immuno-onkologisk forskning. Cellelinjen udviser en epitel-lignende morfologi karakteriseret ved adhærente, flade celler med en tykkelse på mindre end 5 µm og en omtrentlig fordoblingstid på 22–30 timer. H1299-celler udtrykker keratin og vimentin, men er negative for neurofilament-tripletprotein, hvilket afspejler en fænotype med både epitel- og mesenkymale karakteristika.

Genetisk set har H1299-celler en homozygot delvis deletion i TP53-genet, hvilket resulterer i et fuldstændigt tab af p53-proteinekspression. Linjen er også karakteriseret ved vildtype KRAS-status, hvilket adskiller den fra andre NSCLC-modeller såsom A549-celler, som bærer endogene KRAS-mutationer. På grund af fraværet af funktionel p53-signalering kombineret med intakt KRAS anvendes H1299-celler hyppigt til at studere tumorsuppressorbiologi, onkogene signalveje, apoptose, metastase og terapeutiske resistensmekanismer. Sammenlignet med mere epiteliale NSCLC-cellelinjer såsom A549 udviser H1299-celler en mere mesenkymalt fænotype med reduceret ekspression af epitelmarkører, hvilket gør dem særligt anvendelige til undersøgelser af epitel-til-mesenkym-overgang (EMT), invasion og metastatisk progression.

Det er også rapporteret, at H1299-celler syntetiserer neuropeptidet neuromedin B (NMB) i lave niveauer, mens de mangler påviselig produktion af gastrinfrigivende peptid (GRP). Deres robuste vækstkarakteristika, høje transfekterbarhed og velkarakteriserede molekylære baggrund har bidraget til deres brede anvendelse i studier, der involverer målrettede terapier, genredigering, immunmedieret cytotoksicitet og nedstrøms KRAS-associerede signalveje. Som med alle langtidsdyrkede tumorcellemodeller anbefales periodisk autentificering og bekræftelse af centrale molekylære egenskaber for at sikre eksperimentel reproducerbarhed.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring