NCI-H1299

NCI-H1299（亦稱 H1299）是一種人類非小細胞肺癌（NSCLC）細胞系，源自一名成年男性肺癌患者的淋巴結轉移灶。 H1299 與 H292 細胞一樣，廣泛用作癌症生物學及免疫腫瘤學研究中的非小細胞肺癌（NSCLC）模型。該細胞系呈現上皮樣形態，特徵為附著性、扁平的細胞，厚度小於 5 µm，約倍增時間為 22–30 小時。 H1299 細胞表達角蛋白和維曼汀，但對神經絲三聚體蛋白呈陰性，反映出兼具上皮與間質特徵的表型。

從遺傳學角度來看，H1299 細胞攜帶 TP53 基因的純合性部分缺失，導致 p53 蛋白質表達完全喪失。該細胞系還具有野生型 KRAS 狀態，這使其有別於其他非小細胞肺癌（NSCLC）模型（例如攜帶內源性 KRAS 突變的 A549 細胞）。 由於缺乏功能性的 p53 訊號傳導，加上 KRAS 基因完整無缺，H1299 細胞常被用於研究腫瘤抑制基因生物學、致癌訊號傳導路徑、細胞凋亡、轉移以及治療抗藥性機制。 相較於 A549 等更具上皮特徵的非小細胞肺癌細胞系，H1299 細胞呈現更明顯的間質表型，且上皮標記物表達較低，因此特別適用於研究上皮-間質轉化（EMT）、侵襲及轉移進展。

另有研究指出，H1299 細胞雖能以低水平合成神經肽神經介質 B（NMB），但無法檢測到胃泌素釋放肽（GRP）的產生。 其強勁的生長特性、高轉染效率以及特徵明確的分子背景，使其廣泛應用於靶向治療、基因編輯、免疫介導的細胞毒性，以及下游 KRAS 相關訊號傳導路徑等研究。 與所有長期培養的腫瘤細胞模型一樣，建議定期進行鑑定並確認關鍵分子特徵，以確保實驗的可重複性。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。