Przejdź do treści
NCI-H716
Chusteczka
Cecum
Choroba
Gruczolakorak kątnicy
Miejsce przerzutów
Wodobrzusze
Synonimy
NCI H716, NCI-H716, H-716, NCIH716

Dokumenty

NCI-H716

Cell line · Numer produktu 305079

The NCI-H716 cell line is a human adenocarcinoma cell line derived from the colon. It was established from the metastatic site in the ascites of a 33-year...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NCI-H716 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka pochodząca z okrężnicy. Została ona uzyskana z przerzutów w wodobrzuszu 33-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej. Jedną z charakterystycznych cech linii komórkowej NCI-H716 jest jej zdolność do ekspresji i wydzielania hormonów enteroendokrynnych, w szczególności glukagonopodobnego peptydu 1 (GLP-1), co czyni ją wysoce istotną w badaniach nad fizjologią hormonów jelitowych i układu enteroendokrynnego. Aspekt ten ma kluczowe znaczenie dla badań nad cukrzycą, zwłaszcza w kontekście badania hormonalnej regulacji wydzielania insuliny i homeostazy glukozy.

Komórki te są przystosowane do wzrostu jako pływające agregaty lub w hodowli zawiesinowej, co jest nieco nietypowe dla komórek pochodzących z nabłonka. Zdolność do wzrostu w zawiesinie pozwala na badanie interakcji komórkowych i szlaków sygnałowych w trójwymiarowym środowisku hodowlanym, które może naśladować warunki in vivo bardziej niż tradycyjne hodowle jednowarstwowe. Linia komórkowa NCI-H716 była szeroko wykorzystywana do badania szlaków transdukcji sygnału zaangażowanych w wydzielanie hormonów, odpowiedź na środki farmakologiczne oraz interakcję między komórkami nabłonka jelitowego a mikrobiotą. Badania z wykorzystaniem tej linii komórkowej znacząco przyczyniły się do zrozumienia patofizjologii chorób przewodu pokarmowego i rozwoju strategii terapeutycznych ukierunkowanych na oś jelitowo-mózgową.

Ponadto, komórki NCI-H716 są wykorzystywane do testowania związków terapeutycznych pod kątem ich potencjalnego wpływu na wydzielanie i odpowiedź receptorową. Ich unikalny profil hormonalny umożliwia również ich wykorzystanie w badaniach farmakodynamicznych i odkrywaniu leków związanych z zaburzeniami metabolicznymi i otyłością. W ten sposób NCI-H716 służy jako istotne narzędzie w medycynie translacyjnej, łącząc badania podstawowe i zastosowania kliniczne w chorobach żołądkowo-jelitowych i metabolicznych.

Chusteczka
Cecum
Choroba
Gruczolakorak kątnicy
Miejsce przerzutów
Wodobrzusze
Synonimy
  • NCI H716
  • NCI-H716
  • H-716
  • NCIH716

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Czas podwojenia
50 godzin

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H716 (numer katalogowy Cytion 305079)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1581

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Gęstość wysiewu
> 3 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
Dodawać 1 ml świeżej pożywki dziennie, można pominąć weekendy i oddzielać klastry przez pipetowanie w razie potrzeby
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
33 lata
Pochodzenie etniczne
Europejski