NCI-H716

A linhagem celular NCI-H716 é uma linhagem de adenocarcinoma humano derivada do cólon. Ela foi isolada a partir de um foco metastático presente na ascite de um homem caucasiano de 33 anos. Uma das características marcantes da linhagem celular NCI-H716 é sua capacidade de expressar e secretar hormônios enteroendócrinos, notadamente o peptídeo semelhante ao glucagon 1 (GLP-1), o que a torna altamente relevante no estudo da fisiologia dos hormônios intestinais e do sistema enteroendócrino. Esse aspecto é crucial para a pesquisa sobre diabetes, especialmente no contexto da investigação da regulação hormonal da secreção de insulina e da homeostase da glicose.

Essas células estão adaptadas para crescer como agregados flutuantes ou em cultura em suspensão, o que é um tanto incomum para células derivadas do epitélio. A capacidade de crescer em suspensão permite o estudo de interações celulares e vias de sinalização em um ambiente de cultura tridimensional, que pode imitar as condições in vivo de forma mais fiel do que as culturas tradicionais em monocamada. A linhagem celular NCI-H716 tem sido amplamente utilizada para explorar as vias de transdução de sinal envolvidas na secreção de hormônios, na resposta a agentes farmacológicos e na interação entre as células epiteliais intestinais e a microbiota. Estudos que utilizam essa linhagem celular têm contribuído significativamente para a compreensão da fisiopatologia de doenças gastrointestinais e para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas direcionadas ao eixo intestino-cérebro.

Além disso, as células NCI-H716 são utilizadas para testar compostos terapêuticos quanto aos seus efeitos potenciais sobre a secreção e a resposta dos receptores. Seu perfil hormonal único também permite seu uso em estudos farmacodinâmicos e na descoberta de medicamentos relacionados a distúrbios metabólicos e obesidade. Assim, a linha NCI-H716 serve como uma ferramenta vital na medicina translacional, fazendo a ponte entre a pesquisa básica e as aplicações clínicas em doenças gastrointestinais e metabólicas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.