Siirry sisältöön
NCI-H716
Kudos
Cecum
Sairaus
Cecumin adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
NCI H716, NCI-H716, H-716, NCIH716

Asiakirjat

NCI-H716

Cell line · Tuotenumero 305079

The NCI-H716 cell line is a human adenocarcinoma cell line derived from the colon. It was established from the metastatic site in the ascites of a 33-year...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H716-solulinja on ihmisen paksusuolen adenokarsinoomasolulinja. Se on peräisin 33-vuotiaan valkoihoisen miehen askiteksen etäpesäkkeestä. Yksi NCI-H716-solulinjan ominaisuuksista on sen kyky ilmentää ja erittää enteroendokriinisiä hormoneja, erityisesti glukagonin kaltaista peptidiä 1 (GLP-1), mikä tekee siitä erittäin merkittävän suolistohormonien fysiologian ja enteroendokriinisen järjestelmän tutkimuksen kannalta. Tämä näkökohta on ratkaisevan tärkeä diabetestutkimuksen kannalta, erityisesti kun tutkitaan insuliinin erityksen ja glukoosin homeostaasin hormonaalista säätelyä.

Nämä solut ovat sopeutuneet kasvamaan kelluvina aggregaatteina tai suspensioviljelyssä, mikä on hieman epätavallista epiteelistä peräisin oleville soluille. Kyky kasvaa suspensiossa mahdollistaa solujen vuorovaikutusten ja signaalireittien tutkimisen kolmiulotteisessa viljely-ympäristössä, joka voi jäljitellä in vivo -olosuhteita paremmin kuin perinteiset monokerrosviljelmät. NCI-H716-solulinjaa on hyödynnetty laajasti tutkittaessa signaalinsiirtoreittejä, jotka liittyvät hormonien eritykseen, vasteeseen farmakologisille aineille sekä suolen epiteelisolujen ja mikrobiston väliseen vuorovaikutukseen. Tällä solulinjalla tehdyt tutkimukset ovat edistäneet merkittävästi ruoansulatuskanavan sairauksien patofysiologian ymmärtämistä ja suolisto-aivoakseliin kohdistuvien hoitostrategioiden kehittämistä.

Lisäksi NCI-H716-soluja käytetään terapeuttisten yhdisteiden testaamiseen niiden mahdollisten vaikutusten selvittämiseksi eritykseen ja reseptorivasteeseen. Niiden ainutlaatuinen hormonaalinen profiili mahdollistaa myös niiden käytön farmakodynaamisissa tutkimuksissa ja aineenvaihduntahäiriöihin ja liikalihavuuteen liittyvässä lääkekehityksessä. Näin ollen NCI-H716 toimii elintärkeänä välineenä translaatiolääketieteessä, joka yhdistää ruoansulatuskanavan ja aineenvaihduntasairauksien perustutkimuksen ja kliiniset sovellukset.

Kudos
Cecum
Sairaus
Cecumin adenokarsinooma
Metastaasikohde
Askites
Synonyymit
  • NCI H716
  • NCI-H716
  • H-716
  • NCIH716

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kaksinkertaistumisaika
50 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H716 (Cytionin luettelonumero 305079)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1581

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Kylvötiheys
> 3 x 105 solua/ml
Nesteen uusiminen
Lisätään päivittäin 1 ml tuoretta elatusainetta, viikonloppuisin voidaan jättää pois, ja erotetaan klusterit pipetoimalla tarpeen mukaan
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
33 vuotta
Etnisyys
Eurooppalainen