Μετάβαση στο περιεχόμενο
NCI-H460
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Μεγαλοκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460

Έγγραφα

NCI-H460

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305020

NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Το NCI-H460, επίσης γνωστό ως H460, προήλθε από έναν άνδρα ασθενή με μεγαλόκυτταρο καρκίνωμα του πνεύμονα. Τα κύτταρα NCI-H460 είναι προσκολλημένα κύτταρα που αναπτύσσονται δύο φορές ταχύτερα από τα κύτταρα A549 με χρόνο διπλασιασμού 33 ώρες σε RPMI 1640 συμπληρωμένο με 10% FBS. Μπορούν να σχηματίσουν όγκους τόσο σε in vitro όσο και σε in vivo μοντέλα, συμπεριλαμβανομένων των γυμνών ποντικών. Τα κύτταρα NCI-H460 έχει αποδειχθεί ότι εκφράζουν mRNA p53 σε υψηλά επίπεδα συγκρίσιμα με τον φυσιολογικό πνευμονικό ιστό, ενώ δεν παρουσιάζουν ακαθάριστες δομικές ανωμαλίες του DNA. Χρωστούν θετικά για την κερατίνη και τη βιμεντίνη, αλλά είναι αρνητικά για την τριπλέτα πρωτεΐνη νευροϊνών. Η ισοενζυμική ανάλυση έδειξε ότι η HPRT εντοπίζεται στην επιφάνεια αυτών των κυτταρικών σειρών μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα. Τα ισοένζυμα AK-1, ES-D και Me-2 εκφράζονται στο επίπεδο 1, ενώ τα ισοένζυμα G6PD και PGM1 και PGM3 εκφράζονται στο επίπεδο Β και 1-2, αντίστοιχα. Τα κύτταρα έχουν υποτριπλοειδή καρυότυπο με μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 57, που κυμαίνεται από 53 έως 65. Επτά χρωμοσώματα-δείκτες είναι κοινά σε όλα τα κύτταρα, συμπεριλαμβανομένων των der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). Τα υψηλά επίπεδα έκφρασης του p53 mRNA τα καθιστούν κατάλληλο μοντέλο για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών του μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα.
Ιστός
Πνεύμονας
Ασθένεια
Μεγαλοκυτταρικό καρκίνωμα του πνεύμονα
Θέση μετάστασης
Υπεζωκοτική συλλογή
Συνώνυμα
  • NCI-H460
  • NCI.H460
  • H-460
  • NCIH460
  • NCI-HUT-460
  • NCI-460

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Ογκογόνος
Ναι

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
H-460 (αριθμός καταλόγου Cytion 305020)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0459

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Εθνικότητα
Ευρωπαϊκό

Ίσως χρειαστείτε επίσης