Skip to content
NCI-H295R
Tissue
בלוטת יותרת הכליה
Disease
קרצינומה
Synonyms
NCI-H295R, NCI H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1

Documents

NCI-H295R

Cell line · Product number 300483

H295R was adapted from the NCI-H295 pluripotent adrenocortical carcinoma cell line established by A.F. Gazdar and associates (1990) from a carcinoma of the a...

US$450.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
H295R הותאם מקו תאי קרצינומה אדרנו-קורטיקלית פלוריפוטנטית NCI-H295, שהוקם על ידי A.F. Gazdar ושות' (1990) מקרצינומה של קליפת יותרת הכליה. התאים המקוריים הותאמו לתרבית שהפחיתה את זמן הכפלת האוכלוסייה מ-5 ימים ל-2 ימים. התאים המותאמים נבחרו לגדול בשכבה אחת, בניגוד לתאים המקוריים שגדלו בתמיסה. קו תאים זה שומר על היכולת לייצר אנדרוגנים יותרת הכליה. הוא מגיב לאנגיוטנסין II וליוני אשלגן.
Tissue
בלוטת יותרת הכליה
Disease
קרצינומה
Synonyms
  • NCI-H295R
  • NCI H295R
  • NCIH295R
  • H-295R
  • H295R-S1

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
NCI-H295R (מספר קטלוגי Cytion 300483)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0458

05Expression and susceptibility

Products
אלדוסטרון, קורטיזול, סטרואידים C19

06Handling and culture

Culture medium
ניתן לרכוש את מצע הגידול התאי NCI-H295R המוכן לשימוש (820402) או לבחור להוסיף ל-DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820400a) עם התוספים הבאים
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 5% FBS, 0.00625 מ"ג/מ"ל אינסולין, 0.00625 מ"ג/מ"ל טרנספרין, 6.25 נ"ג/מ"ל סלניום, 1.25 מ"ג/מ"ל אלבומין סרום בקר, 0.00535 מ"ג/מ"ל חומצה לינולאית
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
48 שעות
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
48 שנים
Ethnicity
קווקזי