Ga naar de inhoud
NCI-H295R
Weefsel
Bijnier
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
NCI-H295R, NCI H295R, NCIH295R, H-295R, H295R-S1

Documenten

NCI-H295R

Cell line · Productnummer 300483

H295R was adapted from the NCI-H295 pluripotent adrenocortical carcinoma cell line established by A.F. Gazdar and associates (1990) from a carcinoma of the a...

€650.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
H295R werd aangepast van de NCI-H295 pluripotente adrenocorticale carcinoomcellijn die door A.F. Gazdar en medewerkers (1990) werd gemaakt van een carcinoom van de bijnierschors. De oorspronkelijke cellen werden aangepast aan een kweekmedium dat de verdubbelingstijd van de populatie terugbracht van 5 dagen naar 2 dagen. De aangepaste cellen werden geselecteerd om in een monolaag te groeien, in tegenstelling tot de oorspronkelijke cellen die in suspensie groeiden. Deze cellijn behoudt het vermogen om bijnier androgenen te produceren. Ze reageert op angiotensine II en kaliumionen.
Weefsel
Bijnier
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
  • NCI-H295R
  • NCI H295R
  • NCIH295R
  • H-295R
  • H295R-S1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H295R (Cytion catalogusnummer 300483)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0458

05Expressie en vatbaarheid

Producten
Aldosteron, cortisol, C19 steroïden

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Je kunt ons kant-en-klare NCI-H295R celgroeimedium (820402) kopen of ervoor kiezen om DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glucose, w: 2,5 mM L-glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a) aan te vullen met de volgende additieven
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 5% FBS, 0,00625 mg/mL insuline, 0,00625 mg/mL transferrine, 6,25 ng/mL selenium, 1,25 mg/mL runderserumalbumine, 0,00535 mg/mL linolzuur
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
48 uur
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
48 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch