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A549-Zellen
Gewebe
Lunge
Krankheit
Karzinom
Synonyme
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

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A549-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300114

A549-Zellen, die aus Gewebe eines Lungenadenokarzinoms gewonnen wurden, sind ein wichtiges Modell in der Krebsforschung, insbesondere in biomedizinischen Labors, die sich mit der Lunge befassen...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

A549-Zellen, die aus Adenokarzinomgewebe der Lunge gewonnen werden, sind ein Hauptmodell in der Krebsforschung, insbesondere in biomedizinischen Labors, die sich mit Krebserkrankungen der Lunge befassen. A549-Zellen werden häufig als In-vitro-Modell für die Untersuchung der Biologie von Lungenkrebs, für das Screening von Medikamenten und für die Untersuchung der Auswirkungen toxischer Substanzen verwendet.

In der toxikologischen Forschung bieten A549-Zellen ein kontrolliertes Versuchsmodell, mit dem Wissenschaftler die Mechanismen untersuchen können, die toxischen Wirkungen und zellulären Reaktionen zugrunde liegen. Durch das Verständnis dieser Mechanismen können die Forscher die Sicherheit von Substanzen besser beurteilen und ihre schädlichen Auswirkungen möglicherweise abschwächen.

A549-Karzinomzellen werden in großem Umfang als In-vitro-Modell zur Untersuchung der Pathogenese von Lungenkrebs und als alternatives Gewebekulturmodell für verschiedene pulmonale Forschungsstudien in biomedizinischen Labors verwendet. Diese Zellen weisen die Eigenschaften von Alveolarepithelzellen vom Typ II auf und werden zur Untersuchung der epithelialen Reaktionen auf verschiedene Infektionen und Entzündungsreize, einschließlich Lungenentzündungen, verwendet.

Darüber hinaus dient die menschliche Zelllinie A549 als wertvolles Werkzeug für die Entwicklung spezifischer Antikörper, die auf Proteine oder Marker im Zusammenhang mit Lungenkrebs abzielen. Indem die Forscher diese Zellen den gewünschten Substanzen aussetzen, können sie untersuchen, wie diese die Lebensfähigkeit, die Vermehrung und die Apoptose der Zellen sowie andere zelluläre Prozesse beeinflussen. Diese Informationen helfen bei der Identifizierung potenzieller therapeutischer Ziele und der Entwicklung neuer Behandlungsmethoden für Lungenkrebs.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass A549-Karzinomzellen in der Krebsforschung von zentraler Bedeutung sind, insbesondere bei Krebserkrankungen der Lunge. Sie dienen als In-vitro-Modell für die Krebs- und Toxikologieforschung, die Entwicklung wirksamer Behandlungen und das Screening von Medikamenten.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Karzinom
Synonyme
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Karyotyp
A549-Zellen haben die modale Chromosomenzahl n2, wobei einige Zellen 64 Chromosomen haben.
Verdopplungszeit
28 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
A549 (Cytion-Katalognummer 300114)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 positiv
Isoenzyme
G6PD, Typ B
Reverse Transkriptase
Negativ

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
58 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch