Pereiti prie turinio
A549 ląstelės
Audinys
Plaučiai
Liga
Karcinoma
Sinonimai
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumentai

A549 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300114

A549 ląstelės, išskirtos iš plaučių adenokarcinomos audinio, yra pagrindinis modelis, naudojamas vėžio tyrimuose, ypač biomedicinos laboratorijose, kurios specializuojasi plaučių...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

A549 ląstelės, gautos iš plaučių adenokarcinomos audinio, yra pagrindinis modelis, naudojamas vėžio tyrimams, ypač biomedicinos laboratorijose, kuriose daugiausia dėmesio skiriama su plaučių vėžiu susijusiems tyrimams. A549 ląstelės dažniausiai naudojamos kaip in vitro modelis plaučių vėžio biologijai, vaistų atrankai ir toksinių junginių poveikiui tirti.

Toksikologiniuose tyrimuose A549 ląstelės yra kontroliuojamas eksperimentinis modelis, leidžiantis mokslininkams ištirti toksinio poveikio ir ląstelių atsako mechanizmus. Suprasdami šiuos mechanizmus, mokslininkai gali geriau įvertinti medžiagų saugumą ir potencialiai sumažinti jų žalingą poveikį.

A549 karcinomos ląstelės plačiai naudojamos kaip in vitro modelis plaučių vėžio patogenezei tirti ir kaip alternatyvus audinių kultūrų modelis įvairiems su plaučių vėžiu susijusiems tyrimams biomedicinos laboratorijose. Šios ląstelės išlaiko II tipo alveolinių epitelio ląstelių savybes ir yra naudojamos epitelio atsakui į įvairias infekcijas ir uždegiminius dirgiklius, įskaitant plaučių uždegimą, tirti.

Be to, žmogaus ląstelių linija A549 yra vertinga priemonė kuriant specifinius antikūnus, skirtus su plaučių vėžiu susijusiems baltymams ar žymenims. Veikiant šias ląsteles dominančiomis medžiagomis, mokslininkai gali ištirti, kaip jos veikia ląstelių gyvybingumą, dauginimąsi, apoptozę ir kitus ląstelinius procesus. Ši informacija padeda nustatyti galimus terapinius taikinius ir kurti naujus plaučių vėžio gydymo būdus.

Apibendrinant galima teigti, kad A549 karcinomos ląstelės yra labai svarbios vėžio tyrimams, ypač susijusiems su plaučių vėžiu, ir yra in vitro modelis vėžio ir toksikologijos tyrimams, veiksmingiems gydymo būdams kurti ir vaistams tikrinti.

Audinys
Plaučiai
Liga
Karcinoma
Sinonimai
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Kariotipas
A549 ląstelių chromosomų skaičius yra n2, o kai kurios ląstelės turi 64 chromosomas.
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
28 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
A549 (Cytion katalogo numeris 300114)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Izofermentai
B tipo G6PD
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
58 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių