Gå til innholdet
A549-celler
Vev
Lunge
Sykdom
Karsinom
Synonymer
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumenter

A549-celler

Cell line · Produktnummer 300114

A549-celler, som stammer fra vev fra lungeadenokarsinom, er en viktig modell som brukes i kreftforskning, særlig i biomedisinske laboratorier som fokuserer på lunge...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A549-celler, som stammer fra lungeadenokarsinomvev, er en viktig modell i kreftforskningen, særlig i biomedisinske laboratorier som fokuserer på lungerelatert kreft. A549-celler brukes ofte som in vitro-modell for å studere lungekreftbiologi, screening av legemidler og effekten av toksiske forbindelser.

I toksikologisk forskning er A549-celler en kontrollert eksperimentell modell som gjør det mulig for forskere å utforske mekanismene som ligger til grunn for toksiske effekter og cellulære responser. Ved å forstå disse mekanismene kan forskerne bedre vurdere sikkerheten til stoffer og potensielt redusere de skadelige effektene av dem.

A549-karsinomceller har blitt mye brukt som in vitro-modell for å studere lungekreftpatogenesen og som en alternativ vevskulturmodell for ulike lungerelaterte forskningsstudier i biomedisinske laboratorier. Disse cellene har de samme egenskapene som alveolære epitelceller av type II, og de brukes til å undersøke epitelets respons på ulike infeksjoner og inflammatoriske stimuli, inkludert lungebetennelse.

Den humane cellelinjen A549 er dessuten et verdifullt verktøy i utviklingen av spesifikke antistoffer rettet mot lungekreftrelaterte proteiner eller markører. Ved å eksponere disse cellene for stoffer av interesse kan forskerne undersøke hvordan de påvirker cellenes levedyktighet, spredning, apoptose og andre cellulære prosesser. Denne informasjonen bidrar til å identifisere potensielle terapeutiske mål og utvikle nye behandlingsformer for lungekreft.

Oppsummert er A549-karsinomceller sentrale i kreftforskningen, spesielt når det gjelder lungerelatert kreft, og fungerer som en in vitro-modell for kreft- og toksikologisk forskning, utvikling av effektive behandlinger og screening av legemidler.

Vev
Lunge
Sykdom
Karsinom
Synonymer
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
A549-celler har det modale kromosomantallet n2, med noen celler med 64 kromosomer.
Fordoblingstid
28 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A549 (Cytion-katalognummer 300114)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53-positiv
Isoenzymer
G6PD, type B
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisitet
Kaukasisk