Tartalomra ugrás
A549 sejtek
Szövet
Tüdő
Betegség
Karcinóma
Szinonimák
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumentumok

A549 sejtek

Cell line · Termékszám 300114

A tüdőadenokarcinóma-szövetből nyert A549 sejtek a rákkutatás egyik legfontosabb modelljei, különösen a tüdőre specializálódott orvostudományi laboratóriumokban...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A tüdő adenokarcinóma szövetéből származó A549 sejtek a rákkutatásban használt elsődleges modell, különösen a tüdővel kapcsolatos rákos megbetegedésekkel foglalkozó orvosbiológiai laboratóriumokban. Az A549 sejteket általában in vitro modellként használják a tüdőrák biológiájának, a gyógyszerek szűrésének és a toxikus vegyületek hatásainak tanulmányozására.

A toxikológiai kutatásokban az A549 sejtek olyan ellenőrzött kísérleti modellt kínálnak, amely lehetővé teszi a tudósok számára a toxikus hatások és a sejtválaszok hátterében álló mechanizmusok feltárását. E mechanizmusok megértésével a kutatók jobban meg tudják ítélni az anyagok biztonságosságát, és potenciálisan enyhíteni tudják káros hatásaikat.

Az A549 karcinóma sejteket széles körben használják in vitro modellként a tüdőrák patogenezisének tanulmányozására és alternatív szövettenyésztési modellként különböző tüdővel kapcsolatos kutatásokhoz az orvosbiológiai laboratóriumokban. Ezek a sejtek fenntartják a II. típusú alveoláris hámsejtek jellemzőit, és a különböző fertőzésekre és gyulladásos ingerekre, köztük a tüdőgyulladásra adott hámválaszok vizsgálatára használják őket.

Ezenkívül az A549 humán sejtvonal értékes eszközként szolgál a tüdőrákkal kapcsolatos fehérjéket vagy markereket célzó specifikus antitestek kifejlesztésében. Azáltal, hogy ezeket a sejteket az érdeklődésre számot tartó anyagoknak teszik ki, a kutatók megvizsgálhatják, hogy azok hogyan befolyásolják a sejtek életképességét, proliferációját, apoptózisát és más sejtfolyamatokat. Ez az információ segít a potenciális terápiás célpontok azonosításában és a tüdőrák újszerű kezeléseinek kifejlesztésében.

Összefoglalva, az A549 karcinóma sejtek kulcsfontosságúak a rákkutatásban, különösen a tüdővel kapcsolatos rákos megbetegedések tekintetében, mivel in vitro modellként szolgálnak a rák- és toxikológiai kutatásokhoz, a hatékony kezelések kifejlesztéséhez és a gyógyszerek szűréséhez.

Szövet
Tüdő
Betegség
Karcinóma
Szinonimák
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Kariotípus
Az A549 sejtek kromoszómaszáma n2, néhány sejt 64 kromoszómával rendelkezik.
Kettőzési idő
28 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
A549 (Cytion katalógusszám: 300114)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
P53 pozitív
Izoenzimek
G6PD, B típus
Fordított transzkriptáz
Negatív

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
58 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi