Preskoči na vsebino
Celice A549
Tkivo
Pljuča
Bolezen
Karcinom
Sinonimi
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumenti

Celice A549

Cell line · Številka izdelka 300114

Celice A549, pridobljene iz tkiva pljučnega adenokarcinoma, so glavni model, ki se uporablja v raziskavah raka, zlasti v biomedicinskih laboratorijih, ki se ukvarjajo s pljuči...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice A549, pridobljene iz tkiva pljučnega adenokarcinoma, so glavni model, ki se uporablja pri raziskavah raka, zlasti v biomedicinskih laboratorijih, ki se osredotočajo na raka, povezanega s pljuči. Celice A549 se pogosto uporabljajo kot model in vitro za preučevanje biologije pljučnega raka, pregledovanje zdravil in učinkov strupenih spojin.

V toksikoloških raziskavah so celice A549 nadzorovan eksperimentalni model, ki znanstvenikom omogoča raziskovanje mehanizmov, na katerih temeljijo toksični učinki in celični odzivi. Z razumevanjem teh mehanizmov lahko raziskovalci bolje ocenijo varnost snovi in potencialno ublažijo njihove škodljive učinke.

Karcinomske celice A549 se pogosto uporabljajo kot model in vitro za preučevanje patogeneze pljučnega raka in kot alternativni model tkivne kulture za različne raziskave, povezane s pljuči, v biomedicinskih laboratorijih. Te celice ohranjajo značilnosti alveolarnih epitelijskih celic tipa II in se uporabljajo za preučevanje epitelijskih odzivov na različne okužbe in vnetne dražljaje, vključno z vnetjem pljuč.

Poleg tega je človeška celična linija A549 dragoceno orodje za razvoj specifičnih protiteles, usmerjenih proti beljakovinam ali označevalcem, povezanim s pljučnim rakom. Z izpostavljanjem teh celic zanimivim snovem lahko raziskovalci raziskujejo, kako vplivajo na viabilnost celic, proliferacijo, apoptozo in druge celične procese. Te informacije pomagajo pri identifikaciji potencialnih terapevtskih ciljev in razvoju novih načinov zdravljenja pljučnega raka.

Karcinomske celice A549 so ključne pri raziskavah raka, zlasti v zvezi z rakom, povezanim s pljuči, saj služijo kot in vitro model za raziskave raka in toksikologijo, razvoj učinkovitih načinov zdravljenja in pregledovanje zdravil.

Tkivo
Pljuča
Bolezen
Karcinom
Sinonimi
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Kariotip
Celice A549 imajo modalno število kromosomov n2, nekatere celice pa 64 kromosomov.
Čas podvojitve
28 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
A549 (kataloška številka Cytion 300114)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 pozitiven
Izoenzimi
G6PD, tip B
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
58 let
Etnična pripadnost
Kavkaški