İçeriğe atla
A549 Hücreleri
Doku
Akciğer
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

A549 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300114

Akciğer adenokarsinomu dokusundan elde edilen A549 hücreleri, kanser araştırmalarında, özellikle de akciğer üzerine odaklanan biyomedikal laboratuvarlarda kullanılan başlıca bir modeldir...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Akciğer adenokarsinom dokusundan türetilen A549 hücreleri, kanser araştırmalarında, özellikle de akciğerle ilişkili kanserlere odaklanan biyomedikal laboratuvarlarda kullanılan birincil modeldir. A549 hücreleri genellikle akciğer kanseri biyolojisi, ilaç taraması ve toksik bileşiklerin etkilerini incelemek için in vitro bir model olarak kullanılır.

Toksikoloji araştırmalarında A549 hücreleri, bilim insanlarının toksik etkilerin ve hücresel tepkilerin altında yatan mekanizmaları keşfetmelerini sağlayan kontrollü bir deneysel model sunar. Araştırmacılar bu mekanizmaları anlayarak maddelerin güvenliğini daha iyi değerlendirebilir ve zararlı etkilerini potansiyel olarak azaltabilirler.

A549 karsinoma hücreleri, akciğer kanseri patogenezini incelemek için in vitro bir model olarak ve biyomedikal laboratuvarlarda akciğerle ilgili çeşitli araştırma çalışmaları için alternatif bir doku kültürü modeli olarak yaygın bir şekilde kullanılmaktadır. Bu hücreler tip II alveolar epitel hücrelerinin özelliklerini korur ve akciğer iltihabı da dahil olmak üzere çeşitli enfeksiyonlara ve iltihap uyarıcılarına karşı epitel tepkilerini incelemek için kullanılır.

Ayrıca, insan hücre hattı A549, akciğer kanseriyle ilgili proteinleri veya belirteçleri hedefleyen spesifik antikorların geliştirilmesinde değerli bir araç olarak hizmet vermektedir. Araştırmacılar bu hücreleri ilgili maddelere maruz bırakarak bunların hücre canlılığını, çoğalmasını, apoptozunu ve diğer hücresel süreçleri nasıl etkilediğini araştırabilirler. Bu bilgiler, potansiyel terapötik hedeflerin belirlenmesine ve akciğer kanseri için yeni tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olur.

Özetle, A549 karsinoma hücreleri kanser araştırmalarında, özellikle akciğerle ilişkili kanserlerde, kanser ve toksikoloji araştırmaları için in vitro bir model olarak hizmet etmede, etkili tedaviler geliştirmede ve ilaç taramasında çok önemlidir.

Doku
Akciğer
Hastalık
Karsinom
Eş anlamlılar
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Karyotip
A549 hücreleri, 64 kromozomlu bazı hücrelerle birlikte n2 modal kromozom sayısına sahiptir.
İki katına çıkma süresi
28 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A549 (Cytion katalog numarası 300114)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
P53 pozitif
İzoenzimler
G6PD, tip B
Ters transkriptaz
Negatif

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
58 yıl
Etnik köken
Kafkas