Ga naar de inhoud
A549-cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Documenten

A549-cellen

Cell line · Productnummer 300114

A549-cellen, afkomstig van weefsel van longadenocarcinoom, vormen een belangrijk model in het kankeronderzoek, met name in biomedische laboratoria die zich richten op long...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

A549 cellen, afkomstig van longadenocarcinoomweefsel, zijn een primair model dat gebruikt wordt in kankeronderzoek, met name in biomedische laboratoria die zich richten op longgerelateerde kankers. A549 cellen worden vaak gebruikt als in vitro model voor het bestuderen van de biologie van longkanker, het screenen van medicijnen en de effecten van toxische stoffen.

In toxicologisch onderzoek bieden A549 cellen een gecontroleerd experimenteel model waarmee wetenschappers de mechanismen die ten grondslag liggen aan toxische effecten en cellulaire reacties kunnen onderzoeken. Door deze mechanismen te begrijpen, kunnen onderzoekers de veiligheid van stoffen beter beoordelen en mogelijk hun schadelijke effecten beperken.

A549 carcinoomcellen zijn uitgebreid gebruikt als in vitro model om de pathogenese van longkanker te bestuderen en als alternatief weefselkweekmodel voor verschillende longgerelateerde onderzoeken in biomedische laboratoria. Deze cellen hebben de kenmerken van type II alveolaire epitheelcellen en worden gebruikt om de epitheliale reacties op verschillende infecties en ontstekingsstimuli, waaronder longontsteking, te onderzoeken.

Bovendien dient de menselijke cellijn A549 als waardevol hulpmiddel bij de ontwikkeling van specifieke antilichamen gericht tegen longkanker-gerelateerde eiwitten of markers. Door deze cellen bloot te stellen aan interessante stoffen kunnen onderzoekers onderzoeken hoe deze de levensvatbaarheid, proliferatie, apoptose en andere cellulaire processen beïnvloeden. Deze informatie helpt bij de identificatie van potentiële therapeutische doelen en de ontwikkeling van nieuwe behandelingen voor longkanker.

Samenvattend kunnen we stellen dat A549 carcinoomcellen van cruciaal belang zijn voor kankeronderzoek, vooral met betrekking tot longgerelateerde kankers, en dienen als in vitro model voor kanker- en toxicologisch onderzoek, het ontwikkelen van effectieve behandelingen en het screenen van medicijnen.

Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Synoniemen
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Karyotype
A549 cellen hebben het modale chromosoomnummer n2, met enkele cellen met 64 chromosomen.
Verdubbelingstijd
28 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
A549 (Cytion catalogusnummer 300114)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
P53-positief
Iso-enzymen
G6PD, type B
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
58 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch