Mine otse sisu juurde
A549 rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumendid

A549 rakud

Cell line · Toote number 300114

Kopsu adenokartsinoomi koest saadud A549-rakud on peamine mudel, mida kasutatakse vähiuuringutes, eriti biomeditsiinilaborites, mis keskenduvad kopsu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A549 rakud, mis on saadud kopsu adenokartsinoomkoest, on peamine mudel, mida kasutatakse vähiuuringutes, eriti biomeditsiinilistes laboratooriumides, mis keskenduvad kopsuga seotud vähkidele. A549 rakke kasutatakse tavaliselt in vitro mudelina kopsuvähi bioloogia, ravimite skriiningu ja toksiliste ühendite mõju uurimiseks.

Toksikoloogiauuringutes pakuvad A549 rakud kontrollitud eksperimentaalset mudelit, mis võimaldab teadlastel uurida toksiliste mõjude ja rakkude vastuste aluseks olevaid mehhanisme. Nende mehhanismide mõistmise kaudu saavad teadlased paremini hinnata ainete ohutust ja potentsiaalselt leevendada nende kahjulikku mõju.

A549 kartsinoomirakke on laialdaselt kasutatud in vitro mudelina kopsuvähi patogeneesi uurimiseks ja alternatiivse koekultuurimudelina mitmesuguste kopsudega seotud uuringute jaoks biomeditsiini laborites. Need rakud säilitavad II tüüpi alveolaarepiteelirakkude omadused ja neid kasutatakse epiteeli vastuste uurimiseks erinevatele infektsioonidele ja põletikulistele stiimulitele, sealhulgas kopsupõletikule.

Lisaks on inimese rakuliin A549 väärtuslik vahend kopsuvähiga seotud valkude või markerite vastu suunatud spetsiifiliste antikehade väljatöötamiseks. Neid rakke huvipakkuvate ainetega kokkupuutes saavad teadlased uurida, kuidas need mõjutavad rakkude elujõulisust, proliferatsiooni, apoptoosi ja muid rakuprotsesse. See teave aitab tuvastada potentsiaalseid terapeutilisi sihtmärke ja töötada välja uusi ravimeetodeid kopsuvähi raviks.

Kokkuvõttes on A549 kantsinoomi rakud vähiuuringutes, eriti kopsuvähi puhul, kes on in vitro mudeliks vähi ja toksikoloogia uurimisel, tõhusa ravi väljatöötamisel ja ravimite skriiningul.

Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Sünonüümid
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Karyotüüp
A549 rakkudel on modaalne kromosoomide arv n2, mõnedel rakkudel on 64 kromosoomi.
Kahekordistumisaeg
28 tundi

04Tunnused

Viide
A549 (Cytioni katalooginumber 300114)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Isoensüümid
G6PD, tüüp B
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
58 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia