Mine otse sisu juurde
BEAS-2B
Kude
Kopsud, bronhid
Sünonüümid
Beas-2B, BEAS 2B, BEAS2B, Beas2B, Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B

Dokumendid

BEAS-2B

Cell line · Toote number 300311

BEAS-2B is an immortalized cell line derived from the bronchial epithelium of a non-cancerous individual. This cell line was established by transforming h...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Tellimusel valmistatud
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

BEAS-2B on immortaliseeritud rakuliin, mis on saadud mitte-kasvaja bronhide epiteelist. See rakuliin loodi inimese bronhide epiteelirakkude transformeerimise teel adenoviiruse 12-SV40 hübriidviirusega, mis annab rakkudele pikendatud eluea, säilitades samas paljud primaarsetele bronhide epiteelirakkudele iseloomulikud morfoloogilised ja funktsionaalsed omadused. BEAS-2B rakke kasutatakse laialdaselt hingamisteede haiguste uurimisel, eriti sissehingatavate ainete toksikoloogilise ja farmakoloogilise mõjuga seotud uuringutes, kuna need pärinevad hingamisteede epiteelist.

Kultiveerimisel on sellel rakuliinil koobastikmorfoloogia ja see säilitab teatavad kriitilised omadused, näiteks võime metaboliseerida ksenobiootilisi ühendeid, mis muudab need väga oluliseks ravimite metabolismi ja hingamisteede toksikoloogia uuringutes. Neid on laialdaselt kasutatud ka astma, kroonilise obstruktiivse kopsuhaiguse (KOK) ja vähi rakumehhanismide uurimisel. BEAS-2B rakud reageerivad prognoositavalt tsütokiinidele, oksüdatiivsele stressile ja muudele stiimulitele, mis on iseloomulikud hingamisteede kokkupuutele keskkonnamõjuritega. See muudab nad väärtuslikuks mudeliks põletiku ja oksüdatiivse stressi mehhanismide uurimiseks kopsurakkudes.

BEAS-2B rakke kasutatakse biomeditsiiniuuringutes sageli ka õhu kaudu levivate osakeste kantserogeensuse hindamiseks, kus nad on mudeliks, et mõista muutusi hingamisteede epiteelirakkudes pärast kokkupuudet kantserogeenidega. Nende geneetiline koostis ja vastuvõtlikkus geneetilisele manipuleerimisele suurendavad veelgi nende kasulikkust molekulaarbioloogilistes katsetes, mille eesmärk on mõista kopsuhaiguste ja vähi arenguga seotud geeniekspressiooni ja signaaliradu.

Kude
Kopsud, bronhid
Sünonüümid
  • Beas-2B
  • BEAS 2B
  • BEAS2B
  • Beas2B
  • Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human bronchial epithelial cell line (BEAS-2B) contains an Ad12-SV40 hybrid construct introduced by transfection, enabling immortalization without viral particle release. The hybrid adenovirus/SV40 insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
BEAS-2B (Cytioni katalooginumber 300311)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0168

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Ad12-SV40 hübriidviirus
Tooted
Keratiinid, SV-40 T antigeen

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Hingamisteede epiteelirakkude baasmedium (PromoCell GmbH)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda kasvukeskkonna täiendusseguga (PromoCell GmbH)
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata vanus