Siirry sisältöön
A549-solut
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Syöpä
Synonyymit
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Asiakirjat

A549-solut

Cell line · Tuotenumero 300114

Keuhkojen adenokarsinoomakudoksesta peräisin olevat A549-solut ovat keskeinen malli syöpätutkimuksessa, erityisesti keuhkosairauksiin keskittyvissä biolääketieteen laboratorioissa...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A549-solut, jotka on saatu keuhkojen adenokarsinoomakudoksesta, ovat ensisijainen malli, jota käytetään syöpätutkimuksessa, erityisesti keuhkosyöpiin liittyviin syöpiin keskittyvissä biolääketieteen laboratorioissa. A549-soluja käytetään yleisesti in vitro -mallina keuhkosyövän biologian, lääkeseulonnan ja myrkyllisten yhdisteiden vaikutusten tutkimiseen.

Toksikologisessa tutkimuksessa A549-solut tarjoavat kontrolloidun kokeellisen mallin, jonka avulla tutkijat voivat tutkia toksisten vaikutusten ja soluvasteiden taustalla olevia mekanismeja. Ymmärtämällä näitä mekanismeja tutkijat voivat paremmin arvioida aineiden turvallisuutta ja mahdollisesti lieventää niiden haitallisia vaikutuksia.

A549-karsinoomasoluja on käytetty laajalti in vitro -mallina keuhkosyövän patogeneesin tutkimiseen ja vaihtoehtoisena kudosviljelymallina erilaisissa keuhkoihin liittyvissä tutkimuksissa biolääketieteen laboratorioissa. Nämä solut säilyttävät tyypin II alveoliepiteelisolujen ominaisuudet, ja niitä käytetään tutkimaan epiteelin vasteita erilaisiin infektioihin ja tulehdusärsykkeisiin, myös keuhkotulehdukseen.

Lisäksi ihmisen A549-solulinja toimii arvokkaana välineenä kehitettäessä keuhkosyöpään liittyviin proteiineihin tai merkkiaineisiin kohdistuvia vasta-aineita. Altistamalla nämä solut kiinnostaville aineille tutkijat voivat tutkia, miten ne vaikuttavat solujen elinkelpoisuuteen, lisääntymiseen, apoptoosiin ja muihin soluprosesseihin. Nämä tiedot auttavat tunnistamaan mahdollisia terapeuttisia kohteita ja kehittämään uusia hoitomuotoja keuhkosyöpään.

Yhteenvetona voidaan todeta, että A549-karsinoomasolut ovat keskeisessä asemassa syöpätutkimuksessa, erityisesti keuhkosyöpien osalta, ja ne toimivat in vitro -mallina syöpä- ja toksikologisessa tutkimuksessa, tehokkaiden hoitojen kehittämisessä ja lääkkeiden seulonnassa.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Syöpä
Synonyymit
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Karyotyyppi
A549-solujen kromosomiluku on n2, ja joillakin soluilla on 64 kromosomia.
Kaksinkertaistumisaika
28 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
A549 (Cytionin luettelonumero 300114)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
P53-positiivinen
Isoentsyymit
G6PD, tyyppi B
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
58 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen