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A549/DDP
Gewebe
Lunge

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A549/DDP

Cell line · Artikelnummer 305047

Die Zelllinie A549/DDP ist eine arzneimittelresistente Variante der Zelllinie A549, die ihrerseits ein Modell für das alveoläre basale Epitheladenokarzinom des Menschen darstellt. Diese …

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Anpassung / Empfehlungen

Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die A549/DDP-Zelllinie ist eine arzneimittelresistente Variante der A549-Zelllinie, die ihrerseits ein Modell des menschlichen alveolären Basalepithel-Adenokarzinoms ist. Diese Variante wurde speziell wegen ihrer Resistenz gegen Cisplatin (DDP) ausgewählt, ein gängiges Chemotherapeutikum, das bei der Behandlung verschiedener Krebsarten, einschließlich Lungenkrebs, eingesetzt wird. Die Entwicklung der A549/DDP-Zelllinie ermöglicht es den Forschern, die Mechanismen zu untersuchen, die der Chemoresistenz zugrunde liegen, die eine große Herausforderung in der Krebstherapie darstellt.

In der Forschung wird die A549/DDP-Zelllinie verwendet, um die biochemischen Pfade zu untersuchen, die an der Cisplatin-Resistenz beteiligt sind. Dazu gehört die Erforschung von Veränderungen der Genexpression, der Proteinfunktion und des zellulären Stoffwechsels, die eine Resistenz gegen Cisplatin bewirken. Die Zelllinie ist auch wertvoll für das Screening neuer Medikamente oder Medikamentenkombinationen, die die Resistenz überwinden können, und liefert Erkenntnisse, die für die Entwicklung wirksamerer Therapiestrategien gegen Lungenkrebs entscheidend sind.

Darüber hinaus tragen Studien mit der A549/DDP-Zelllinie zu einem besseren Verständnis der molekularen Grundlagen des Fortschreitens und der Metastasierung von Lungenkrebs im Zusammenhang mit der Chemoresistenz bei. Diese Zelllinie ist ein wichtiges Instrument für die translationale Forschung, das eine Brücke zwischen experimentellen Erkenntnissen und möglichen klinischen Anwendungen in der Onkologie schlägt.

Gewebe
Lunge

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
A549/DDP (Cytion-Katalognummer 305047)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.