Ir diretamente para o conteúdo
A549/DDP
Tecido
Pulmão

Documentos

A549/DDP

Cell line · Número do produto 305047

A linha celular A549/DDP é uma variante resistente a fármacos da linha celular A549, que, por sua vez, constitui um modelo de adenocarcinoma epitelial basal alveolar humano. Esta...

€2,000.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Feito por encomenda
1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular A549/DDP é uma variante resistente aos medicamentos da linha celular A549, que é um modelo de adenocarcinoma epitelial basal alveolar humano. Esta variante foi especificamente selecionada pela sua resistência à cisplatina (DDP), um medicamento de quimioterapia comum utilizado no tratamento de vários tipos de cancro, incluindo o cancro do pulmão. O desenvolvimento da linha celular A549/DDP permite aos investigadores estudar os mecanismos subjacentes à quimiorresistência, que constitui um desafio importante na terapia do cancro.

Na investigação, a linha celular A549/DDP é utilizada para investigar as vias bioquímicas envolvidas na resistência à cisplatina. Isto inclui a exploração de alterações na expressão genética, na função proteica e no metabolismo celular que conferem resistência à cisplatina. A linha celular é também valiosa para o rastreio de novos fármacos ou combinações de fármacos que possam ultrapassar a resistência, fornecendo informações cruciais para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas mais eficazes contra o cancro do pulmão.

Além disso, os estudos que utilizam a linha celular A549/DDP contribuem para uma melhor compreensão da base molecular da progressão do cancro do pulmão e das metástases no contexto da quimiorresistência. Esta linha celular constitui uma ferramenta fundamental para a investigação translacional, fazendo a ponte entre os resultados experimentais e as potenciais aplicações clínicas em oncologia.

Tecido
Pulmão

02Classificação

Organismo
Humano
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
A549/DDP (número de catálogo da Cytion 305047)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.