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A549/DDP
Tissu
Poumon

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A549/DDP

Cell line · Référence du produit 305047

La lignée cellulaire A549/DDP est une variante résistante aux médicaments de la lignée cellulaire A549, qui constitue elle-même un modèle d'adénocarcinome épithélial basal alvéolaire humain. Celle-ci...

€2,000.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire A549/DDP est une variante résistante aux médicaments de la lignée cellulaire A549, qui est elle-même un modèle d'adénocarcinome basal alvéolaire humain. Cette variante a été spécifiquement sélectionnée pour sa résistance au cisplatine (DDP), un médicament de chimiothérapie couramment utilisé dans le traitement de divers cancers, dont le cancer du poumon. Le développement de la lignée cellulaire A549/DDP permet aux chercheurs d'étudier les mécanismes sous-jacents à la chimiorésistance, qui constitue un défi majeur dans le traitement du cancer.

En recherche, la lignée cellulaire A549/DDP est utilisée pour étudier les voies biochimiques impliquées dans la résistance au cisplatine. Cela inclut l'exploration des changements dans l'expression des gènes, la fonction des protéines et le métabolisme cellulaire qui confèrent une résistance au cisplatine. La lignée cellulaire est également précieuse pour le criblage de nouveaux médicaments ou de combinaisons de médicaments qui peuvent surmonter la résistance, fournissant ainsi des informations cruciales pour le développement de stratégies thérapeutiques plus efficaces contre le cancer du poumon.

En outre, les études utilisant la lignée cellulaire A549/DDP contribuent à une meilleure compréhension de la base moléculaire de la progression du cancer du poumon et des métastases dans le contexte de la chimiorésistance. Cette lignée cellulaire est un outil essentiel pour la recherche translationnelle, qui permet de faire le lien entre les résultats expérimentaux et les applications cliniques potentielles en oncologie.

Tissu
Poumon

02Classification

Organisme
Humain
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale

04Identifiants

Référence
A549/DDP (numéro de catalogue 305047 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.