ETK-1

ETK-1 è una linea cellulare di colangiocarcinoma intraepatico umano (IHCCA) originariamente isolata dal liquido ascitico di un paziente adulto affetto da colangiocarcinoma sarcomatoide. Il tumore da cui è stata derivata la linea ETK-1 presentava sia componenti di adenocarcinoma tubulare che sarcomatoidi, e la linea cellulare riflette il fenotipo sarcomatoide. Le cellule ETK-1 crescono in modo aderente come un monostrato epiteliale uniforme dall’aspetto a ciottoli, composto principalmente da piccole cellule poligonali con nuclei da rotondi a ovali e nucleoli prominenti. Le cellule nei primi passaggi hanno mostrato un tempo di raddoppio della popolazione di circa 70 ore e un cariotipo iperdiploide con un numero modale di cromosomi intorno alla metà dei 70, coerente con l’instabilità cromosomica tipica delle neoplasie aggressive delle vie biliari.

Dal punto di vista immunofenotipico, le cellule ETK-1 esprimono marcatori epiteliali biliari tra cui la γ-glutamil transpeptidasi (GGT), la citocheratina 18 (CK18) e la citocheratina 19 (CK19), a conferma della loro origine colangiocitica. In condizioni basali, risultano negative per i marcatori associati agli epatociti, quali l’alfa-fetoproteina (AFP) e l’albumina. Le cellule ETK-1 esprimono la vimentina, il che riflette le loro caratteristiche sarcomatoidi e il fenotipo parzialmente mesenchimale, mentre non esprimono l’antigene carcinoembrionale (CEA) e l’antigene carboidrato 19-9 (CA19-9). Questo profilo marcatoriale corrisponde alla componente sarcomatoide osservata nel tumore primario ed evidenzia caratteristiche compatibili con proprietà simili alla transizione epiteliale-mesenchimale.

L’ETK-1 è stata inoltre utilizzata come modello per studiare la plasticità cellulare e la differenziazione del lignaggio nel colangiocarcinoma. Il trattamento con l’inibitore della metiltransferasi del DNA 5-azacitidina ha indotto cambiamenti morfologici e fenotipici, dando origine a una linea cellulare derivata con caratteristiche simili a quelle degli epatociti, tra cui l’espressione di AFP, albumina, integrina α1 e trombopoietina, insieme alla perdita di alcuni marcatori biliari. Nei modelli di xenotrapianto, le cellule ETK-1 non trattate formano tumori compatibili con l’adenocarcinoma tubulare che presentano un fenotipo duttale. Questi risultati dimostrano che la linea cellulare ETK-1 conserva la plasticità differenziale e costituisce un prezioso sistema in vitro per lo studio della transdifferenziazione dall’epitelio biliare a quello epatocitario, della regolazione epigenetica e dell’eterogeneità tumorale nel colangiocarcinoma intraepatico.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia