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SCC-4
Tessuto
Lingua
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
SCC 4, SCC4

Documenti

SCC-4

Cell line · Codice prodotto 305384

SCC-4 is a human tongue squamous cell carcinoma (SCC) cell line widely used in cancer research to explore mechanisms of oral cancer progression, apoptosis...

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01Informazioni generali

Descrizione

L'SCC-4 è una linea cellulare di carcinoma squamoso della lingua umana (SCC) ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro per esplorare i meccanismi di progressione del cancro orale, l'apoptosi e la risposta agli agenti chemioterapici. Il carcinoma orale a cellule squamose è un tumore maligno comune nella cavità orale ed è spesso legato a fattori legati allo stile di vita, come l'uso di tabacco e il consumo di alcol. Le cellule SCC-4 sono caratterizzate da una natura aggressiva e sono utilizzate per modellare il comportamento del tumore e la resistenza ai trattamenti in vitro.

Gli studi condotti sulle cellule SCC-4 hanno dimostrato che diversi composti, come la reina, l'emodina e la berberina, inducono l'apoptosi attraverso vie intrinseche (dipendenti dai mitocondri) ed estrinseche (mediate dai recettori di morte). La reina induce l'arresto del ciclo cellulare in fase S e l'apoptosi attraverso lo stress del reticolo endoplasmatico, la generazione di ROS e la disfunzione mitocondriale, innescando l'attivazione delle caspasi-8, -9 e -3. Analogamente, è stato dimostrato che l'emodina causa l'arresto della fase G2/M e induce l'apoptosi attraverso l'interruzione del potenziale di membrana mitocondriale e la promozione del rilascio di citocromo c. Anche la berberina induce l'apoptosi nelle cellule SCC-4 aumentando la produzione di ROS, incrementando il Ca2+ intracellulare e diminuendo il potenziale di membrana mitocondriale, attivando così le vie della caspasi-9 e della caspasi-3.

Questi risultati dimostrano che la SCC-4 è un modello efficace per studiare i meccanismi molecolari dell'apoptosi in risposta a potenziali agenti antitumorali, fornendo indicazioni sulle strategie terapeutiche rivolte al carcinoma orale a cellule squamose.

Tessuto
Lingua
Malattia
Carcinoma a cellule squamose
Sinonimi
  • SCC 4
  • SCC4

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SCC-4 (numero di catalogo Cytion 305384)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1684

05Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: TP53, p.Pro151Ser (c.451C>T)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e 400 ng/mL di idrocortisone
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
55 anni
Etnia
Caucasico