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U-343 MG
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
U-343MG, U-343-MG, U343MG, U-343, U343, 343 MG, 343MG

Documenti

U-343 MG

Cell line · Codice prodotto 300365

The U-343 MG cell line is derived from a human glioblastoma, a type of aggressive brain tumor. Originally isolated from a 54-year-old Caucasian male, this...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare U-343 MG deriva da un glioblastoma umano, un tipo di tumore cerebrale aggressivo. Originariamente isolata da un uomo caucasico di 54 anni, questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata nella ricerca neurologica, in particolare negli studi sulla patologia e sulle strategie di trattamento terapeutico del glioblastoma. La linea cellulare U-343 MG si distingue per le sue proprietà astrocitarie, simili a quelle degli astrociti del cervello, che la rendono particolarmente utile per lo studio del comportamento tumorale e della neurobiologia in un ambiente controllato in vitro.

Dal punto di vista genetico, le cellule U-343 MG sono caratterizzate da diverse mutazioni tipiche del glioblastoma, tra cui alterazioni del gene TP53 e del gene EGFR. Queste mutazioni non solo offrono approfondimenti sulle basi molecolari della malignità del glioblastoma, ma fungono anche da potenziali bersagli per interventi terapeutici. La linea cellulare viene anche utilizzata per valutare la citotossicità dei farmaci e per studiare i meccanismi di resistenza che le cellule di glioblastoma possono sviluppare. Ciò rende la U-343 MG un modello prezioso per valutare l'efficacia di nuovi agenti chemioterapici e per esplorare nuovi paradigmi terapeutici, come la terapia mirata e l'immunoterapia.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
  • U-343MG
  • U-343-MG
  • U343MG
  • U-343
  • U343
  • 343 MG
  • 343MG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
U-343 MG (numero di catalogo Cytion 300365)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_S471

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
GFAP: il 95% delle cellule è risultato positivo.

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
54 anni
Etnia
Caucasico