Pāriet uz saturu
WPMY-1
Audums
Prostatas, stromas
Sinonīmi
WPMY1

Dokumenti

WPMY-1

Cell line · Preces numurs 305083

WPMY-1 is a human prostatic myofibroblast cell line derived from the peripheral zone of the prostate. This cell line was established from the primary cult...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

WPMY-1 ir cilvēka prostatas miofibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no prostatas perifērās zonas. Šī šūnu līnija tika izveidota no 54 gadus veca kaukāzieša vīrieša prostatas fibroblastu primārās kultūras. Šīm šūnām ir raksturīga vārpstas formas morfoloģija un gludās muskulatūras aktīna ekspresija, kas atspoguļo to miofibroblastisko fenotipu. WPMY-1 šūnas ir nenovērtējams instruments stromas un epitēlija mijiedarbības izpētei prostatā, jo īpaši prostatas vēža progresēšanas un attīstības kontekstā.

WPMY-1 šūnu līnija ir plaši izmantota pētījumos, kas vērsti uz parakrīno un autokrīno signālu mehānismiem starp prostatas vēža šūnām un to mikrovidi. Ir zināms, ka šīs šūnas izdala virkni citokīnu un augšanas faktoru, kas var ietekmēt prostatas vēža šūnu augšanu, invāziju un metastāzēšanu. WPMY-1 līnija kalpo arī kā spēcīgs modelis, lai pētītu dažādu farmakoloģisko līdzekļu ietekmi uz miofibroblastu uzvedību audzēja mikrovietā. Turklāt pētījumi, kuros izmantota WPMY-1 līnija, ir ievērojami veicinājuši izpratni par miofibroblastu lomu labdabīgas prostatas hiperplāzijas (BPH) patofizioloģijā un ar šo slimību saistītajām fibrotiskajām izmaiņām.

Papildus to izmantošanai vēža un fibrozes pētījumos WPMY-1 šūnas ir izmantotas arī pētījumos, kuros tiek pētīti jauni terapeitiskie mērķi un zāļu testēšana, sniedzot ieskatu sarežģītajās mijiedarbībās prostatas dziedzerī, kas veicina slimības attīstību. Šī šūnu līnija saglabā vairākus būtiskus vecāku šūnu fenotipa un funkciju aspektus, padarot to par daudzpusīgu un vērtīgu resursu prostatas slimību pētniecībā.

Audums
Prostatas, stromas
Sinonīmi
  • WPMY1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Miofibroblasti
Tumorogēns
Nē

04Identifikatori

Atsauce
WPMY-1 (Cytion kataloga numurs 305083)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3814

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Androgēnu receptoru, izteikts
Proteīnu ekspresija
Fibronektīns, gludās muskulatūras alfa-aktīns, vimentīns
Antigēna ekspresija
Kallikreīns 3, KLK3 (prostatas specifiskais antigēns, PSA), Homo sapiens

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi