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WPMY-1
Tecido
Próstata, estroma
Sinónimos
WPMY1

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WPMY-1

Cell line · Número do produto 305083

WPMY-1 is a human prostatic myofibroblast cell line derived from the peripheral zone of the prostate. This cell line was established from the primary cult...

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1

01Informações gerais

Descrição

A WPMY-1 é uma linha celular de miofibroblastos prostáticos humanos derivada da zona periférica da próstata. Esta linha celular foi estabelecida a partir da cultura primária de fibroblastos prostáticos de um doente caucasiano de 54 anos. Estas células caracterizam-se pela sua morfologia fusiforme e pela expressão de actina do músculo liso, o que reflecte o seu fenótipo miofibroblástico. As células WPMY-1 são uma ferramenta inestimável para estudar as interações estroma-epiteliais na próstata, particularmente no contexto da progressão e desenvolvimento do cancro da próstata.

A linha celular WPMY-1 tem sido amplamente utilizada em investigação centrada nos mecanismos de sinalização parácrina e autócrina entre as células cancerosas da próstata e o seu microambiente. Sabe-se que estas células segregam uma série de citocinas e factores de crescimento que podem influenciar o crescimento, a invasão e a metástase das células do cancro da próstata. A linha WPMY-1 também serve como um modelo robusto para investigar os efeitos de vários agentes farmacológicos sobre o comportamento dos miofibroblastos no microambiente tumoral. Além disso, os estudos efectuados com a linha WPMY-1 contribuíram significativamente para a compreensão do papel dos miofibroblastos na fisiopatologia da hiperplasia benigna da próstata (HBP) e das alterações fibróticas associadas a esta doença.

Para além da sua utilização em estudos sobre o cancro e a fibrose, as células WPMY-1 também têm sido utilizadas em investigação que explora novos alvos terapêuticos e testes de medicamentos, fornecendo informações sobre as interações complexas no interior da glândula prostática que contribuem para a doença. Esta linha celular mantém vários aspectos críticos do fenótipo e da função das células parentais, o que a torna um recurso versátil e valioso na investigação das doenças da próstata.

Tecido
Próstata, estroma
Sinónimos
  • WPMY1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Miofibroblastos
Tumorigénico
Não

04Identificadores

Referência
WPMY-1 (número de catálogo da Cytion 305083)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3814

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Recetor de androgénio, expresso
Expressão proteica
Fibronectina, alfa-actina do músculo liso, vimentina
Expressão do antígeno
Kallikrein 3, KLK3 (antigénio específico da próstata, PSA), Homo sapiens

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
54 anos