Ga naar de inhoud
HMEC-1
Weefsel
Huid
Synoniemen
Hmec-1, HMEC1, CDC/EU.HMEC-1, Human Microvascular Endothelial Cell line-1

Documenten

HMEC-1

Cell line · Productnummer 304064

HMEC-1 cells, or Human Microvascular Endothelial Cells-1, are an immortalized cell line derived from human dermal microvascular endothelial cells. This ce...

€650.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HMEC-1 cellen, of Human Microvascular Endothelial Cells-1, zijn een geïmmortaliseerde cellijn afgeleid van menselijke dermale microvasculaire endotheelcellen. Deze cellijn is ontwikkeld om onderzoek naar de microvasculaire endotheelfunctie en pathologie te vergemakkelijken. HMEC-1 cellen worden veel gebruikt in vasculair biologisch onderzoek vanwege hun vermogen om veel van de fenotypische en functionele kenmerken van primaire endotheelcellen te behouden.

HMEC-1 cellen vertonen typische endotheelcel markers zoals CD31 (PECAM-1), von Willebrand factor en VE-cadherine, en ze kunnen capillaire structuren vormen wanneer ze gekweekt worden op geschikte matrices, waardoor angiogenese in vitro wordt nagebootst. Dit maakt ze bijzonder waardevol voor studies naar angiogenese, de vorming van nieuwe bloedvaten uit reeds bestaande vasculatuur, een cruciaal proces in zowel fysiologische als pathologische omstandigheden zoals wondgenezing, kankergroei en hart- en vaatziekten.

Deze cellen worden ook gebruikt om de reactie van endotheelcellen op inflammatoire cytokinen, de barrièrefunctie van endotheellagen en de interactie tussen endotheelcellen en andere celtypen zoals immuuncellen te onderzoeken. HMEC-1 cellen kunnen genetisch gemanipuleerd worden, waardoor onderzoekers de invloed van specifieke genen op de endotheelfunctie kunnen onderzoeken en verschillende vaatziekten kunnen modelleren.

Verder dienen HMEC-1 cellen als modelsysteem voor het bestuderen van de doorlaatbaarheid van endotheelbarrières, wat cruciaal is in de context van het toedienen van medicijnen en de pathogenese van infectieziekten waarbij pathogenen endotheelbarrières passeren. De veelzijdigheid en het gebruiksgemak van de cellijn maken het nog steeds tot een hoeksteen in studies van microvasculaire endotheelcelbiologie en pathologie.

Weefsel
Huid
Toepassingen
Onderzoek naar menselijke dermale endotheelcellen
Synoniemen
  • Hmec-1
  • HMEC1
  • CDC/EU.HMEC-1
  • Human Microvascular Endothelial Cell line-1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (HMEC-1) contains an SV40 T-Antigen construct delivered via the pSVT vector, enabling robust proliferation and immortalization. The construct is stably integrated into endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Endotheelachtig

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HMEC-1 (Cytion catalogusnummer 304064)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0307

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Von Willebrand's factor (vWF), celadhesiemoleculen ICAM-1
Virussen
Simian virus 40 (groot T-antigeen)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w/o: Ribonucleosiden, w/o: Deoxyribonucleosiden, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 10 ng/mL epidermale groeifactor, 1 microgram/mL hydrocortison, 10 mM glutamine
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
1 maand