Siirry sisältöön
HMEC-1
Kudos
Iho
Synonyymit
Hmec-1, HMEC1, CDC/EU.HMEC-1, Human Microvascular Endothelial Cell line-1

Asiakirjat

HMEC-1

Cell line · Tuotenumero 304064

HMEC-1 cells, or Human Microvascular Endothelial Cells-1, are an immortalized cell line derived from human dermal microvascular endothelial cells. This ce...

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HMEC-1-solut eli Human Microvascular Endothelial Cells-1 ovat kuolematon solulinja, joka on peräisin ihmisen ihon mikroverisuonten endoteelisoluista. Tämä solulinja kehitettiin helpottamaan mikrovaskulaarisen endoteelin toiminnan ja patologian tutkimusta. HMEC-1-soluja käytetään laajalti verisuonibiologian tutkimuksessa, koska ne pystyvät säilyttämään monia primaaristen endoteelisolujen fenotyyppisiä ja toiminnallisia ominaisuuksia.

HMEC-1-soluissa on tyypillisiä endoteelisolujen merkkiaineita, kuten CD31 (PECAM-1), von Willebrand-tekijä ja VE-kadheriini, ja ne voivat muodostaa kapillaarimaisia rakenteita, kun niitä viljellään sopivilla matriiseilla, jäljitellen angiogeneesiä in vitro. Tämä tekee niistä erityisen arvokkaita angiogeneesiä eli uusien verisuonten muodostumista jo olemassa olevasta verisuonistosta käsittelevissä tutkimuksissa, jotka ovat kriittinen prosessi sekä fysiologisissa että patologisissa olosuhteissa, kuten haavojen paranemisessa, syövän kasvussa ja sydän- ja verisuonitaudeissa.

Näitä soluja käytetään myös tutkimaan endoteelisolujen vasteita tulehdussytokiineille, endoteelikerrosten estefunktiota sekä endoteelisolujen ja muiden solutyyppien, kuten immuunisolujen, välistä vuorovaikutusta. HMEC-1-soluja voidaan geneettisesti manipuloida, minkä ansiosta tutkijat voivat tutkia tiettyjen geenien vaikutusta endoteelin toimintaan ja mallintaa erilaisia verisuonisairauksia.

Lisäksi HMEC-1-solut toimivat mallijärjestelmänä endoteeliesteiden läpäisevyyden tutkimisessa, mikä on ratkaisevan tärkeää lääkkeiden annostelun ja sellaisten infektiosairauksien patogeneesin kannalta, joissa taudinaiheuttajat ylittävät endoteeliesteet. Solulinjan monipuolisuus ja helppokäyttöisyys tekevät siitä edelleen kulmakiven mikrovaskulaaristen endoteelisolujen biologian ja patologian tutkimuksissa.

Kudos
Iho
Sovellukset
Ihmisen ihoendoteelisoluja koskevat tutkimukset
Synonyymit
  • Hmec-1
  • HMEC1
  • CDC/EU.HMEC-1
  • Human Microvascular Endothelial Cell line-1

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (HMEC-1) contains an SV40 T-Antigen construct delivered via the pSVT vector, enabling robust proliferation and immortalization. The construct is stably integrated into endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Endoteelin kaltaiset

04Tunnisteet

Lähdeviite
HMEC-1 (Cytionin luettelonumero 304064)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0307

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Von Willebrandin tekijä (vWF), solujen adheesiomolekyylit ICAM-1
Virukset
Simian virus 40 (suuri T-antigeeni)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiili glutamiini, w/o: Ribonukleosidit, w/o: Deoksiribonukleosidit, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:ää, 10 ng/mL epidermaalista kasvutekijää, 1 mikrogrammaa/mL hydrokortisonia, 10 mM glutamiinia
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
1 kuukausi