Přejít na obsah
HMEC-1
Tkáň
Kůže
Synonyma
Hmec-1, HMEC1, CDC/EU.HMEC-1, Human Microvascular Endothelial Cell line-1

Dokumenty

HMEC-1

Cell line · Číslo výrobku 304064

HMEC-1 cells, or Human Microvascular Endothelial Cells-1, are an immortalized cell line derived from human dermal microvascular endothelial cells. This ce...

€650.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky HMEC-1 neboli Human Microvascular Endothelial Cells-1 jsou imortalizovanou buněčnou linií odvozenou z lidských kožních mikrovaskulárních endoteliálních buněk. Tato buněčná linie byla vyvinuta pro usnadnění výzkumu funkce a patologie mikrovaskulárního endotelu. Buňky HMEC-1 jsou hojně využívány ve výzkumu cévní biologie díky své schopnosti zachovat si mnoho fenotypových a funkčních vlastností primárních endoteliálních buněk.

Buňky HMEC-1 vykazují typické markery endoteliálních buněk, jako jsou CD31 (PECAM-1), von Willebrandův faktor a VE-kadherin, a při kultivaci na vhodných matricích mohou vytvářet struktury podobné kapilárám, čímž napodobují angiogenezi in vitro. To je činí obzvláště cennými pro studium angiogeneze, tvorby nových cév z již existujících cév, což je kritický proces ve fyziologických i patologických stavech, jako je hojení ran, růst rakoviny a kardiovaskulární onemocnění.

Tyto buňky se také používají ke zkoumání reakcí endotelových buněk na zánětlivé cytokiny, bariérové funkce endotelových vrstev a interakce mezi endotelovými buňkami a jinými typy buněk, jako jsou imunitní buňky. Buňky HMEC-1 lze geneticky manipulovat, což umožňuje výzkumníkům zkoumat vliv specifických genů na funkci endotelu a modelovat různá cévní onemocnění.

Buňky HMEC-1 navíc slouží jako modelový systém pro studium propustnosti endoteliálních bariér, což je zásadní v souvislosti s podáváním léčiv a patogenezí infekčních onemocnění, při nichž patogeny překračují endoteliální bariéry. Díky své univerzálnosti a snadnému použití je tato buněčná linie i nadále základním kamenem při studiu biologie a patologie mikrovaskulárních endoteliálních buněk.

Tkáň
Kůže
Aplikace
Výzkumné studie lidských kožních endoteliálních buněk
Synonyma
  • Hmec-1
  • HMEC1
  • CDC/EU.HMEC-1
  • Human Microvascular Endothelial Cell line-1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human microvascular endothelial cell line (HMEC-1) contains an SV40 T-Antigen construct delivered via the pSVT vector, enabling robust proliferation and immortalization. The construct is stably integrated into endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Endotelu podobné

04Identifikátory

Citace
HMEC-1 (katalogové číslo Cytion 304064)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0307

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Von Willebrandův faktor (vWF), molekuly buněčné adheze ICAM-1
Viry
Simian virus 40 (velký T antigen)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w/o: Ribonukleosidy, w/o: Deoxyribonukleosidy, w: 1,0 mM Pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS, 10 ng/ml epidermálního růstového faktoru, 1 mikrogram/ml hydrokortizonu, 10 mM glutaminu
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
1 měsíc